【摘 要】
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目的:G蛋白偶联受体(GPCR)是人体最大的膜受体家族,参与多种人体生理和病理功能。GPR183在正常造血中发挥重要作用,但其是否参与急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)发生发展尚不清楚。本文通过分析GPR183在T-ALL中的表达并构建过表达GPR183的T-ALL Cutll1细胞系,明确GPR183对Cutll1细胞增殖与细胞凋亡的影响,初步探索GPR183促进T-ALL Cutll1细胞凋亡
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目的:G蛋白偶联受体(GPCR)是人体最大的膜受体家族,参与多种人体生理和病理功能。GPR183在正常造血中发挥重要作用,但其是否参与急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)发生发展尚不清楚。本文通过分析GPR183在T-ALL中的表达并构建过表达GPR183的T-ALL Cutll1细胞系,明确GPR183对Cutll1细胞增殖与细胞凋亡的影响,初步探索GPR183促进T-ALL Cutll1细胞凋亡的分子机制。方法:通过转录组测序(RNA-seq)检测儿童T-ALL细胞与正常儿童T细胞中差异表达的GPCR基因,并使用两个GSE数据库、q-PCR验证13例患者与4例对照组GPR183的表达,WB验证2个对照与4种T-ALL细胞系GPR183的表达,构建过表达GPR183慢病毒载体,包装病毒感染Cutll1细胞,q-PCR和Western blot分析病毒感染细胞后GPR183表达;CCK-8、Annexin V、Hoechest、PI(Propidium iodide,碘化丙啶)染色检测GPR183对Cutll1细胞功能的影响。结果:RNA-seq数据中发现GPR183在T-ALL中表达显著降低,GSE26713和GSE66638两个T-ALL GSE数据库中GPR183表达与测序结果一致,分别在13例儿童T-ALL样本和4种T-ALL细胞系中验证GPR183 m RNA与蛋白表达也证实GPR183在T-ALL中表达明显降低;成功构建过表达GPR183慢病毒载体并建立稳定过表达GPR183Cutll1细胞系;GPR183过表达后Cutll1细胞生长明显降低(p<0.001),细胞凋亡显著增加(p<0.01),但细胞周期无明显变化。结论:GPR183在儿童T-ALL细胞中表达异常降低,初步显示GPR183能抑制Cutll1细胞生长、促进细胞凋亡,可能在T-ALL的发生发展中起着重要作用。
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