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本文主要从以下几方面展开论述： 第一章 ITGB6、PIK3R3、NCALD和LAMA3基因甲基化水平与卵巢癌化疗耐药及临床意义的研究 目的:探讨ITGB6、PIK3R3、NCALD和LAMA3甲基化与卵巢癌临床病理参数和相关预后的关系。 方法:焦磷酸测序检测54例卵巢癌耐药组织和53例卵巢癌敏感组织中ITGB6、PIK3R3、NCALD和LAMA3位点的甲基化频率。 结果:(1) ITGB6、NCALD、LAMA3甲基化频率在耐药组中高于敏感组;PIK3R3甲基化频率在耐药组和敏感组中无明显差异。(2)ITGB6、NCALD、LAMA3、PIK3R3高甲基化患者OS较低甲基化患者短。 结论:ITGB6、NCALD、LAMA3特定位点甲基化水平是预测卵巢癌化疗耐药和预后的有效生物标志物。 第二章 ITGB6、PIK3R3、NCALD和LAMA3基因表达水平与卵巢癌化疗耐药、临床意义及其与甲基化关系的分析 目的:明确卵巢癌化疗敏感组织和耐药组织中ITGB6、PIK3R3、NCALD和LAMA3表达量，分析表达与卵巢癌临床病理参数和相关预后的影响因素，探讨ITGB6、PIK3R3、NCALD和LAMA3表达与甲基化的关系。 方法:QRT-PCR检测卵巢癌化疗敏感组织和耐药组织中mRNA表达量;免疫组化检测卵巢癌化疗敏感组织和耐药组织中蛋白表达量。 结果:(1)NCALD在耐药组中表达下调;NCALD(chr8:102804678、chr8:102804702)位点甲基化水平与NCALD mRNA表达呈负相关;NCALD高表达组PFS较低表达组更长。(2) PIK3R3在耐药组和敏感组中表达无明显差异;PIK3R3蛋白高表达组PFS较低表达组更短。(3) LAMA3在耐药组中表达下调;LAMA3(chr18:21452788和chr18:21452819)位点甲基化水平与其mRNA表达显著负相关;LAMA3蛋白高表达组PFS、OS较低表达组更长。(4)ITGB6在耐药组和敏感组中表达无明显差异;ITGB6表达与临床预后未见明显相关。(5)蛋白表达联合诊断化疗耐药的敏感度为0.692，特异度为0.691(AUC=0.73，P=0.00)。 结论: NCALD、LAMA3在耐药组中表达下调，对预测卵巢癌化疗耐药和不良预后有重要意义。PIK3R3表达水平是预测卵巢癌生存的有效生物标志物。NCALD、LAMA3可能通过其甲基化水平调控基因表达参与卵巢癌化疗耐药。 第三章 ITGB6、PIK3R3、NCALD和LAMA3基因在卵巢癌细胞和顺铂耐药裸鼠模型中的甲基化水平检测 目的:探讨卵巢癌耐药细胞系及裸鼠移植瘤中ITGB6、PIK3R3、NCALD和LAMA3启动子区域位点甲基化水平。 方法:焦磷酸测序检测卵巢癌细胞系和顺铂耐药卵巢癌裸鼠模型中ITGB6、PIK3R3、NCALD和LAMA3的甲基化水平。 结果:(1) ITGB6在SKOV3和SKOV3DDP中的甲基化频率无明显差异;ITGB6在顺铂耐药裸鼠移植瘤的甲基化水平低于敏感裸鼠移植瘤组织。(2) NCALD、PIK3R3在SKOV3DDP和顺铂耐药裸鼠移植瘤中的甲基化水平高于SKOV3和敏感裸鼠移植瘤组织;NCALD在顺铂耐药裸鼠移植瘤的甲基化水平高于敏感裸鼠移植瘤组织。(3) LAMA3在SKOV3DDP和顺铂耐药裸鼠移植瘤中的平均甲基化频率低于SKOV3和顺铂敏感裸鼠移植瘤。 结论:在体外耐药细胞和裸鼠移植瘤模型中，PIK3R3、NCALD在耐药细胞和组织中高甲基化状态。