水稻作为我国的主要粮食作物之一,杂交稻育种为水稻产量的提高作出了巨大贡献,水稻杂交育种依赖于雄性不育材料的应用。前期曾分离到一个隐性核基因控制的水稻籼型雄性不育突变体ms92,组织切片分析结果表明该突变体花药绒毡层的异常降解,小孢子发育异常,最终导致雄性不育。利用图位克隆技术分离到MS92基因(粳稻中该基因命名为PTC1),该基因编码一个PHD结构域的核蛋白,并通过调节下游基因在水稻花药绒毡层降解和花粉壁发育过程中发挥重要作用。本研究利用酵母双杂交技术从水稻全生育期CDNA文库中筛选与MS92相互作的蛋白,并对编码候选蛋白的基因进行分离验证和相应T-DNA插入突变体的表型分析,获得的结果如下:1.通过酵母双杂交筛选到15个与MS92相互作蛋白,进一步生物信息学和表达谱分析以及在酵母体内的基因全长验证,结果表明,OsEMF2b(LO(C_Os09g13630)和LOC_Os099g3670基因为目标候选基因。2.对 OsEMF2b(LOC_Os09g13630)基因的 T-DNA 插入突变体 osemf2b 进行共分离检测,结果显示osemf2b突变表型与T-DNA插入共分离,纯合突变体植株矮小,且颖花表现为花药少、少颖壳、半边壳、外稃畸形等不同类型的畸形花发育;osemf2b的组织切片结果表明突变体的绒毡层在小孢子和空泡期时期发育异常,最终导致花粉育性降低,甚至不育。3.LOC_Os09g3367 基因的T-DNA插入突变体不仅突变表型与T-DNA插入共分离,而且杂合突变体的花粉育性显著降低,且因T-DNA插入位置位于该基因的启动子区域-2bp处,造成基因的表达量下调。