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光皮树(Swida wilsoniana),为山茱萸科梾木属落叶乔木或灌木。光皮树适应性广、材质优良、抗逆性强,在长江流经的19个省、市、自治区中除青海、西藏、安徽、上海等地,都有分布或引种栽培。光皮树果含油率高达34%,属高含油木本油料物种。其油富含多种油脂,可食用,精炼后可为国家一级食用油,具有较高的营养价值;又可加工为生物柴油,经催化剂高温裂解酯化后与0#柴油性能相似,已被国务院列入十二种木本油料植物重点推广对象。大力发展油用光皮树,可以缓解中国能源危机,改善其能源结构,同时可以大幅度减少我国食用油的进口量。目前我国光皮树种质资源尚未得到很好的收集、保存、开发和利用,对光皮树进行表型多样性分析与SSR标记遗传多样性分析,可以为光皮树种质资源核心种质构建提供理论依据。本研究对光皮树叶片转录组进行测序与分析,并以34份光皮树资源为试验材料,22个表型性状、100条EST-SSR引物为研究对象进行试验,了解光皮树表型性状之间的相关性以及它们的大致分类类别。主要研究结果如下:(1)利用Illmina测序平台对光皮树叶片转录组进行测序,共获得2193418个clean reads,组装后获得36839条unigene。光皮树转录组unigene在NR、Pfam、String、Swissprot、KEGG数据库中被注释的分别占总数的69.92%、40.11%、37.35%、45.87%、28.71%。通过与NR数据库进行比对,发现光皮树unigene与葡萄(Vitis vinifera)同源的序列最多,其次是中粒咖啡(Coffea canephora)等。通过GO功能注释所有unigene被分为58个小组3大类。KOG注释,获得功能分类25个类别。根据KEGG代谢通路注释,131 14条unigene参与了 33类代谢途径,共分为5个分枝。(2)采用软件MISA(1.0版),对光皮树叶片的36839条unigene进行SSR搜索,发现有8945条unigene有SSR,占总数的24.3%。共检测到SSR位点12538个,出现频率约为2 514 bp/个。SSR长度范围在10-329 bp,平均长度为22.69bp。一条 unigene 中含有 5、4、3、2、1 个 SSR 位点的分别有 11、37、199、1329、8540条unigene。SSR丰富度依次为二、一、三、四、六、五核苷酸。SSR共有210种重复单元,从一到六核苷酸分别为4、12、60、52、27、55种。SSR重复基元,重复次数均在5-44次,不同重复基元主要以AG/CT,A/T、AT/AT和AC/GT频率最高。(3)通过正交试验光皮树SSR-PCR反应体系最佳组合为:退火温度:55℃;循环次数:34;模板浓度:50 ng/μL;引物量:0.5μL。(4)100条引物通过验证与筛选,得到有效引物82条,有效率达82%。用82条引物对34份光皮树材料进行跑胶验证,结果显示,扩增位点从9-26,观测等位基因数:9-26,平均等位基因数是20.23。34份资源的Shanon信息指数范围为0.1492-0.0259,平均为0.0988,其中最大的是林场2号,其次是老兴1号和优D都为0.1431,最小为49号。通过聚类分析在平均Eclidean距离为15.0,聚类系数为33.5,将34份材料分为4大类。其中四大类分别有18份、11份、4份、1 份,所占比例为 52.94%,32.35%,11.76%,2.94%。(4)光皮树表型性状分析显示,数量性状的变异系数在4.59%-17.63%,变异程度为:花柱长>果含油率>花序宽>叶面积>叶长>花序长>果肉厚>子房长>含水率>小花纵径>百粒重>小花横径>叶宽>雄蕊长>果横径>果纵径>子房宽>花药长;质量性状变异程度依次为:果色>叶形>果形>叶色。(5)表型性状相关性分析结果显示,果实含水率与百粒重、果横径呈显著性正相关,与叶长呈极显著性正相关。果实含油率与叶长、果横径、叶面积、花序宽、叶形呈显著性负相关,与小花横径呈极显著性正相关。百粒重与果横径、雄蕊长呈极显著性正相关。果肉厚与叶形呈显著性负相关,与小花纵径呈显著性正相关。果纵径与果横径呈极显著性正相关,与叶长、叶面积呈显著性正相关,与花序宽呈显著性负相关。果横径与果实形状呈显著性负相关。果实颜色与花序宽、花柱长呈显著性负相关,与雄蕊长呈显著性正相关。果实形状与花药长呈显著性负相关等。(6)光皮树表型聚类结果显示:在平均Eclidean距离为5.0、聚类系数为18.538的时候,34份光皮树资源被聚为4大类。第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类分别有19、9、5、1份资源,占总数的55.88%,26.47%,14.71%,2.94%。SSR分子标记聚类结果为:在平均Eclidean距离为15.0、聚类系数为33.5时为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四大类,分别有 19、10、4、1 份资源,占总数的 55.88%,29.42%,1 1.76%,2.94%。以上研究结果可以为光皮树种质资源核心种质构建提供理论依据,并应用于光皮树种质资源收集、保存和开发利用。