脂肪对于绵羊维持正常生命活动及生理代谢发挥重要的作用,脂肪性状是影响绵羊肌肉品质的一个重要的经济性状。脂联素(Adipoq)是脂肪组织分泌的一种内源性特异蛋白质,也是一种重要的脂肪细胞因子。本试验克隆了小尾寒羊脂联素基因的全长cDNA序列,并对该基因及其所编码的蛋白、mRNA水平和蛋白水平上的表达丰度进行了分析。主要研究结果如下:1.采用RT-PCR和RACE方法,以小尾寒羊组织为试验材料,克隆了小尾寒羊脂联素基因的全长cDNA序列,获得GenBank登录号为KM216385。该基因cDNA全长为2616 bp,包含720 bp的开放阅读框、76 bp的5’非编码区(5’UTR)和1820 bp的3’非编码区(3’UTR)。其中,开放阅读框编码239个氨基酸。2.生物信息学分析显示,脂联素基因编码的蛋白分子量为26 kDa,等电点为5.88,并存在信号肽结构,能被分泌到细胞外发挥作用。在氨基酸序列中,发现2个苏氨酸、3个丝氨酸和3个酪氨酸残基存在磷酸化位点,并发现存在5个O-糖基化位点而无N-糖基化位点。与其他物种的氨基酸同源性分析,证明绵羊脂联素蛋白的氨基酸序列与山羊的相似性最高。3.检测到Adipoq基因在小尾寒羊和杜泊羊中呈现出组织表达差异性。不同组织间,脂联素基因在皮下脂肪、肾周脂肪、腹股沟脂肪、臂二头肌、心血管组织中有表达,在肝脏、肾脏、卵巢组织中未检测到表达,提示脂联素基因的表达有一定的组织特异性。其中,该基因在三种脂肪组织中表达水平最高,极显著高于其他组织(P<0.01),但是三种脂肪组织之间的表达量无显著差异(P>0.05)。不同品种间,脂联素基因在杜泊羊臂二头肌组织中的表达极显著高于小尾寒羊(P<0.01)。4.检测到Adipoq蛋白在小尾寒羊和杜泊羊中存在组织表达差异性。不同组织间,脂联素蛋白在皮下脂肪、肾周脂肪、腹股沟脂肪、臂二头肌、心血管组织中有表达,在肝脏、肾脏组织中未检测到表达。其中,脂联素蛋白在三种脂肪组织中表达量最高,极显著高于臂二头肌和心血管(P<0.01),但是三种脂肪组织之间的表达量无显著差异(P>0.05);不同品种间,脂联素蛋白在三种脂肪组织中的表达量,小尾寒羊均高于杜泊羊,但差异均不显著(P>0.05)。杜泊羊臂二头肌的脂联素蛋白表达量高于小尾寒羊,而心血管中脂联素蛋白表达水平低于小尾寒羊,但是差异也不显著(P>0.05)。综上所述,本研究成功克隆了小尾寒羊脂联素基因,对该基因序列及其编码的氨基酸序列的结构特征进行了预测,并比较分析了小尾寒羊和杜泊羊脂联素基因mRNA水平和蛋白水平上的组织表达谱特征,为后续研究脂联素的功能提供了一定的依据。