本研究从大港油田长期被原油污染的土壤中分离、筛选出4株能以原油为唯一碳源的菌株,挑选出两株原油降解率高的菌种命名为BD和FR。观察形貌特征发现BD为菌落呈圆形,直径约1.5mm,边缘齐整,略微隆起的白色光滑菌落;FR菌落显米白色,边缘齐整略带小刺,圆形不透明,显微镜观察显示菌体为杆状内含椭形芽孢。通过对BD、FR两菌株进行16S r RNA鉴定,将得到两株菌的序列进行BLAST比对、MEGA X构建系统发育树进行分析,发现菌株BD与不动杆菌(Acinetobacter sp.strain white regular)的相似性高达100%,且处于进化树的同一分支。菌株FR与弯曲芽孢杆菌(Bacillus flexus strain MP-9)的相似性高达99.79%,且同处于进化树的一支,表示FR与Bacillus flexus strain的亲缘关系最密切。结合菌落与菌体形貌特征,生化鉴定结果确定菌株BD为约翰逊不动杆菌(Acinetobacter johnsonii),菌株FR为弯曲芽孢杆菌(Bacillus flexus)。当前研究中对假单胞菌属、芽孢杆菌属的报道较多,不动杆菌的报道相对较少,该菌株的发现对丰富原油降解菌的菌种资源具有积极意义。通过对菌株生长曲线,盐度、PH值、温度、底物浓度等环境因素对菌株生长影响,最适条件下BD、FR两菌株原油降解能力的测定进行了菌株特性的研究。分析结果发现,菌株BD的最适盐度为0.1%;FR的最适盐度为0.5%,当盐度超过2%时FR难以生长,BD对盐度有更为广泛的耐受范围。两菌株在PH为7时均表现出最高的生物量,菌株FR在偏碱性环境中仍有良好的生物量,表明FR能耐受一定的碱性环境。菌株FR的最适温度位于29℃左右。菌株BD的最适温度为34℃。两株菌在18℃到42℃范围内均生长良好,FR具有更好的适应高、低温环境的能力。菌株BD的最适原油浓度为300mg/L,菌株FR的最适原油浓度为500mg/L,原油浓度大于500mg/L时两菌株生物量均随原油浓度增大而降低。菌株FR生物量受原油浓度升高影响较小,其表现出较强的污染物耐受能力,在原油浓度为4000mg/L时FR的生物量仍然高达0.65,推测其对原油的高耐受性与芽孢杆菌特殊的细胞结构有关。FR的延滞期较BD更短具有更强的环境适应能力,在接种初期就能获得较高的生物量与原油降解率。BD和FR两菌株在各自最适环境条件下摇瓶震荡培养25d后原油降解率分别为,38.72%和42.95%。原油降解效果良好。