目的:构建特应性皮炎BALB/c小鼠模型,检测并分析小鼠背部皮损区HMGB1的表达,探讨HMGB1、RAGE、ToLL受体及NF-KBp65通路对AD发病的影响,探究丙酮酸乙酯对特应性皮炎皮肤损伤处的保护机制。方法:本实验选取6-8周SPF级-BALB/c-小鼠40只,均为雌性纯系,体重为16-20g,随机分为正常对照组、AD模型组、林格氏组及EP治疗组,每组10只。所有小鼠均适应环境一周。AD组建模:实验第1天、第8天、第15天将0.1%OVA溶液腹腔注射AD组小鼠,第21天对小鼠背部给予脱毛,采用8%硫化钠淀粉溶液,脱毛面积约8cm2。第27天用3M胶带在除毛部位反复粘贴8次。第28-42天每两天将2 cm ×2 cm纱布用0.1%OVA溶液浸润贴于小鼠背部脱毛区,共三周。正常对照组腹腔注射氢氧化铝凝胶三次、第28-42天给予PBS溶液外涂,每次注射及涂抹的时间同AD组。EP治疗组前42天同AD组造模方法,第43天给与腹腔注射100mg/kg丙酮酸乙酯溶液,注射7日,每日一次。林格氏组前42天造模同AD组,第43天给与腹腔注射复方氯化钠溶液,注射时间及次数同上。第49天建模结束,观察四组小鼠10分钟内搔抓次数,并按照皮损区轻中重程度进行炎症评分。使用乙醚将四组小鼠麻醉,眼球取血,室温静置30分钟后离心取上清液,检测四组小鼠血清总IgE、TNF-α的浓度。记录四组小鼠体重、脾脏重量及计算脾指数。取背部皮损处组织进行HMGB1相关蛋白检测及HE染色。结果:1.小鼠皮肤炎症程度评分,AD组、林格氏组皮肤炎症程度评分高于正常对照组、EP治疗组(P<0.05)。2.脾指数及搔抓次数的结果,AD组、林格氏组脾指数高于正常对照组、EP治疗组(P<0.05)。AD组、林格氏组搔抓次数高于正常对照组、EP治疗组(P<0.05)。3.组织病理检测结果:正常对照组小鼠背部皮肤无损伤,镜下未见异常的结构改变。AD组镜下观察可见表皮、真皮层不同程度的增厚,真皮乳头层延长,大量炎性细胞浸润。EP治疗组镜下观察可见表皮、真皮层厚度均变薄,淋巴细胞等炎性细胞浸润减少。4.Western Blot检测:AD组、林格氏组中HMGB1、TLR4、RAGE、NF-κBp65表达明显高于正常对照组、EP治疗组(P<0.05)。5.ELISA检测结果:AD组、林格氏组、EP治疗组小鼠血清中总IgE浓度均高于正常对照组(P<0.05)。AD组、林格氏组小鼠血清中TNF-α浓度高于正常对照组、EP治疗组(P<0.05)。结论:1.AD小鼠模型皮肤炎症程度与皮肤组织中HMGB1、TLR4、RAGE、NF-κBp65表达呈正相关,丙酮酸乙酯可降低HMGB1及其通路的表达,缓解AD小鼠皮肤炎症程度。2.AD小鼠模型皮肤炎症程度与血清TNF-α表达呈正相关,丙酮酸乙酯可降低细胞因子的表达,缓解AD小鼠皮肤炎症程度。3.危险相关模式分子HMGB1蛋白与发病有相关性,其异常变化影响AD发病严重程度。