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该研究在建立失血性休克模型基础上,动态观察不同部位肠粘膜从损伤到修复的变化过程;同时用半定量的方法探讨肠粘膜屏障受损时,肠通透性改变、形态学变化与细胞修复的关系;通过不同阶段杯状细胞的计数,分析判断其在组织重建修复中的作用.研究目的:1.观察肠粘膜I/R损伤后早期的细胞形态学变化特点.2.通过测定失血性休克后门静脉血内毒素的含量,探讨肠通透性的改变与细菌、内毒素移位的关系.3.比较大、小肠对I/R损伤的不同反应.4.通过对肠I/R损伤后不同阶段杯状细胞量的检测,探讨杯状细胞在肠屏障修复中的可能作用.5.分析肠粘膜屏障受损时,肠通透性、形态学变化与细胞修复的关系.实验方法:Wistar雄性大鼠70只,每只体重250-300g,按复苏时间将大鼠随机分为休克复苏后0h(休克复苏0小时)、1h、3 h、6 h、12 h、24 h和正常对照共7组,每组7只.手术前先向胃内灌注乳果糖(每只100mg)和甘露醇(每只50mg)混悬液2ml,60分钟后进行后术,30min内完成.采用Chaudry方法(略作改动)制作大鼠失血性休克模型.腹腔注射无菌乌拉坦(1200mg/Kg)麻醉,无菌剥离颈动脉和颈静脉并进行插管,该管与血压换能器及10ml注射器相连接.插管后立即注入0.3ml肝素生理盐水(含肝素300iu),连续描记血压、心率.测定基础血压后,通过放出和输入的方法使大鼠的平均动脉压(MAP)保持在40mmHg,持续60分钟后,输注所有放出2倍以上的生理盐水使动物复苏,复苏时间30分钟左右,输液的速度1.6-2ml/min.血压恢复正常后开始计算再灌注时间.复苏后大鼠在活杀前仅皮下注射葡萄糖盐水,保持生理需要.正常组动物除不放血和输液外,其他处理与模型组相同,休克模型的建立所需放血量在5-7ml范围.试验鼠分别以休克复苏后0h、1h、3 h、6 h、12 h、24 h剖腹,在肝门静脉处取静脉血约1ml作内毒素测定;留取复苏后1h、3 h、6 h的尿液(通过自行排泄和处死后膀胱穿刺获取);分别取空肠、回肠及结肠粘膜标本,用10％福尔马林及硝酸兰固定后分别做光镜和电镜形态学检查.检测指标:1.光镜和电镜下空肠、回肠、结肠粘膜的形态学变化.2.空肠、回肠、结肠粘膜厚度,肠粘膜损伤指数.3.门静脉血浆内毒素浓度.4.尿乳果糖/甘露醇比值.5.回肠、结肠杯状细胞分布情况及计数.统计学处理:该实验计量资料以X±SD表示,采用SPSS10.0统计软件包处理,两组间比较用t检验,多组间比较用方差分析,P<0.05被认为有统计学意义.