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目的：心脏微血管内皮细胞(CMECs)的在心肌血管新生过程中扮演重要的角色。最近研究表明,脑源性神经营养因子(BDNF)除了在神经系统中起着重要作用外,还在维持血管内皮细胞的存活,促进缺血部位内皮细胞的增殖中发挥重要的作用,是一种重要的血管再生因子。BDNF的受体是TrkB,目前对BDNF-TrkB通路在心脏微血管内皮细胞的功能角色及调控机制尚不清楚。本硕士论文对(1)BDNF对CMECs的增殖及复制性衰老对BDNF受体和对CMECs增殖的影响；(2)及BDNF受体TrkB三种亚型在CMECs表达及复制性衰老可能对三种亚型表达影响进行了研究；(3)传代对CMECs核型的影响进行了研究。方法与结果：(1)对经分离CMECs随传代形态变化及核型分析,研究发现：CMECs在体外传代过程中,随着细胞代数的增加,染色体缺失率上升,染色体数目为42条的细胞比率从63.3%(P20)降至18.6%(P100)；(2)利用实时定量PCR分析,源白年轻大鼠TrkB三种亚型随传代表达量减少,且老年大鼠CMECs中TrkB-FL和TrkB-T2表达量很低或不表达,仅表达TrkB-T1；(3)使用流式细胞术结合AlamarBlue还原法测定细胞生长曲线证明：经BDNF处理的CMECs生长加快,处于分裂期的细胞数量增加,且不同浓度的BDNF刺激具有不同的增幅,其中年轻大鼠CMECs P6 50ng/mL BDNF处理组S期细胞由31.64±1.63%增多至36.27±1.74%(P<0.01), CMECs P14 50ng/mL BDNF处理组S期细胞由25.95±0.39%增多至28.92±1.46%(P<0.01),而老年大鼠CMECs P550ng／mL BDNF处理组S期细胞由30.38±1.02%增多至31.31±0.88%,该变化没有统计学意义(4)选取TrkB三种亚型及基因芯片结果中差异显著的增殖和移行相关基因,应用实时定量PCR分析经BDNF处理后,不同时间点CMECs基因表达的变化,处理8h时,上调1.5倍或以上的基因包括：Syndecan-4(1.78倍)、BGN(1.55倍)、Cav-1(1.56倍)、RTN-4(1.60倍)、MGP(1.69倍)、Hoxdl3(1.97倍)和ACTG-2(1.48倍),下调的基因包括：TrkB-FL(0.78倍)、Nisch(0.63倍)、FLNa(0.55倍)和Spna2(0.72倍)；(5)使用TrkB-shiRNA质粒对CMECs进行转染,运用实时定量PCR对TrkB-FL、TrkB-T1及TrkB-T2的mRNA相对表达进行检测,以确定对该三个亚型表达的影响,并对经转染CMECs增殖的影响进行研究,应用TrkB-shiRNA质粒转染CMECs后,TrkB三种亚型在转染后的四天内mRNA表达均呈下降,且经转染CMECs的生长变慢。结论：(1)经分离CMECs在连续传代20代后染色体开始缺失,且随代数增高缺失增多,细胞形态有所变化；(2)源自年轻大鼠CMECs随着代数的增加,TrkB三种亚型表达量减少,而源自老年大鼠CMECs则只表达TrkB-T1;(3)不同浓度的BDNF均能促进CMECs的增殖,且BDNF会影响CMECs多个基因的表达；(4)利用TrkB-shiRNA质粒能成功沉默CMECs的TrkB-FL、TrkB-T1及TrkB-T2的表达,并初步揭示：抑制TrkB的表达可能会影响CMECs的增殖。