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目的：建立体外分选纯化大鼠神经干细胞的方法，并对提纯所得细胞进行体外培养，通过对不同生长阶段的细胞形态观察和对其分化产物进行鉴定分析，了解提纯所得细胞的增殖和分化特性。方法：将成年大鼠纹状体和胚胎大鼠脑皮层组织制成细胞悬液，用免疫磁珠法对其进行提纯，获得Nestin阳性细胞群。光镜下对提纯前后细胞悬液进行干细胞样细胞百分比计数和流式细胞仪法检测Nestin表达率，将所得数据进行统计学处理后计算出不同来源的细胞提纯前后所含Nestin阳性细胞比例，得出提纯后的神经干细胞纯度；台盼蓝染色法测定提纯前后细胞活力，对所得数据进行统计学处理，了解提纯前后细胞活力的变化；扫描电镜下观察细胞和磁珠结合的情况；对所提纯细胞进行体外培养并诱导分化，光镜下观察其增殖分化过程并利用免疫细胞化学、免疫荧光化学方法鉴定不同培养阶段的细胞性质；同时用RT—PCR法对分化后细胞进行分析，检测某些相关神经基因的mRNA水平的表达。结果：1．免疫磁珠法体外提纯成年大鼠纹状体和胚胎大鼠大脑皮层组织所得Nestin阳性细胞群光镜下计数干细胞样细胞所占比例分别为(89.8±4.7)％和(89.2±4.8)％，流式细胞仪检测Nestin表达率分别为(88.3±1.4)％和(89.5±1.8)％，与提纯前相对比显著提高。2．提纯后的成年大鼠和胚胎大鼠神经干细胞活力分别为(94.9±2.0)％和(96.0±2.4)％，与提纯前无明显差异。3。扫描电镜观察可见细胞表面有数目不等的磁珠紧密结合。4．诱导分化产物中出现有NSE阳性、GFAP阳性、Nestin反应阳性细胞群落。5．RT-PCR法分析mRNA水平有脑因子-1(BF-1)、γ-氨基丁酸(GABA)α-受体γ-亚单位、酪氨酸羟化酶(TH)及色氨酸羟化酶(TPH)等基因的表达。结论：1．免疫磁珠法可快速简便地进行神经干细胞体外分选和纯化，该方法收获的细胞纯度高、细胞活力不受影响。2．免疫磁性分选技术和流式细胞仪及电镜等技术兼容，分选提纯后的细胞可继续进行其他研究。3．该方法提纯的成年大鼠和胚胎大鼠神经干细胞光镜下形态类似，体外培养时均可自我增殖，诱导后分化出多种神经细胞，并有多种相关的神经基因表达。