【摘 要】
：
THTPA（硫胺素三磷酸酶,Thiamine triphosphatase）是催化硫胺素三磷酸（Thiamine triphosphate,TTP）产生硫胺素二磷酸（Thiamine pyrophosphate,TPP）的重要酶类编码基因;TPK1（硫胺焦磷酸激酶,Thiamin pyrophosphokinase 1）基因是硫胺素代谢过程中的关键酶之一,催化两个重要的反应:（1）由硫胺素生成二磷
【基金项目】
：
贵州省科技计划项目,项目名称:生猪现代育种与杂交配套系推广应用,项目编号:黔科合服企[2018]4007（002）； 贵州省农业重大产业科学研究攻关项目,项目名称:山地生态循环健康养猪技术集成与产业化示范,项目编号:黔教合KY字[2019]001；
论文部分内容阅读
THTPA（硫胺素三磷酸酶,Thiamine triphosphatase）是催化硫胺素三磷酸（Thiamine triphosphate,TTP）产生硫胺素二磷酸（Thiamine pyrophosphate,TPP）的重要酶类编码基因;TPK1（硫胺焦磷酸激酶,Thiamin pyrophosphokinase 1）基因是硫胺素代谢过程中的关键酶之一,催化两个重要的反应:（1）由硫胺素生成二磷酸硫胺素的反应;（2）由二磷酸硫胺素生成三磷酸硫胺素的反应。THTPA、TPK1这两个基因对肌肉硫胺素沉积具有重要的影响。本试验以香苏杂交猪为模板,在m RNA、细胞等水平对THTPA、TPK1基因进行研究,旨在探究THTPA、TPK1基因对香苏杂交猪硫胺素沉积的影响。主要研究结果如下:1.THTPA、TPK1基因组织表达及其与硫胺素含量的关联性分析选取长势、饲养方式等外部条件一致的180日龄去势香苏杂交猪公猪为试验材料,分别在饲喂后3h、12h、24h,每个处理组选取3头进行屠宰。利用RT-q PCR技术检测THTPA和TPK1基因在香苏杂交猪大肠（结肠段）、心、肝、小肠（十二指肠段）、脾、肺、肾、背最长肌等8个组织的表达模式。并测定不同时段、不同组织中的硫胺素含量;并对THTPA、TPK1基因的表达与硫胺素含量进行关联性分析。发现THTPA基因相对表达量与硫胺素含量极显著相关（0.657,P＜0.01）,TPK1基因相对表达量与硫胺素含量极显著相关（0.378,P＜0.01）,在背最长肌中THTPA呈现负相关,TPK1呈现正相关。通过克隆香苏杂交猪THTPA、TPK1基因CDS区,并通过生物信息学分析,探究基因在不同物种间的关系。结果显示,香苏杂交猪THTPA、TPK1基因CDS区序列分别为693 bp、714 bp,编码的蛋白分子量分别为25 k Da和26 k Da;主要以无规卷曲和α螺旋为主,且与NCBI中野猪序列完全一致。本试验为后续研究香苏猪硫胺素沉积和胁迫提供理论依据,为进一步研究THTPA、TPK1基因与硫胺素含量的关系奠定基础。2.硫胺素刺激对THTPA、TPK1基因表达的影响研究从香苏杂交猪背最长肌中分离纯化出原代成肌细胞,并利用CCK-8、RTq PCR等试验方法检测外源硫胺素刺激细胞后,细胞内硫胺素含量的变化、细胞增殖能力及THTPA和TPK1的基因表达模式。结果显示:在16000μg/m L外源硫胺素刺激下会抑制细胞增殖（P＜0.05）,在62.5、125、250、500、1000μg/m L浓度对细胞增殖无显著影响（P＞0.05）,而在2000、4000、8000μg/m L浓度下会促进细胞增殖（P＜0.01）。根据是否对细胞增值配置0、500、1000、2000μg/m L外源硫胺素对细胞进行刺激,发现同时间内硫胺素含量随刺激浓度的上升而上升。随着细胞内硫胺硫胺素含量上升,THTPA基因相对表达量减少,呈现负相关,TPK1基因相对表达量上升,呈现正相关。揭示了硫胺素和THTPA、TPK1基因之间的关系,为后续THTPA、TPK1基因功能探究奠定基础。3.THTPA、TPK1基因对硫胺素沉积的影响研究试验构建THTPA、TPK1超表达与RNA干扰载体,将各重组质粒导入成肌细胞中,转染后用CCK-8法检测细胞增殖,试剂盒检测硫胺素含量,分析超表达与干扰对细胞增殖、硫胺素含量的影响,验证THTPA、TPK1基因与硫胺素沉积关系,超表达TPK1、THTPA基因和干扰THTPA、TPK1基因对细胞增值无显著影响。超表达THTPA、TPK1基因会减少成肌细胞中硫胺素相对含量,干扰TPK1、THTPA基因会增加细胞硫胺素含量。研究结果将为探究THTPA与TPK1基因对香苏杂交猪硫胺素沉积的调控机制提供科学数据和理论基础。
其他文献
姜（Zingiber Officinale Rosc）属于姜科姜属草本植物,含有许多营养成分和活性化合物,其中被广泛研究的为姜油树脂和姜精油,姜油树脂中含有较多的姜辣素活性成分,如6-姜醇、6-姜酚、8-姜酚及10-姜酚等。这几种姜辣素的含量常作为评判生姜及其后期加工产品的质量指标,其中6-姜酚和6-姜醇是生姜中的最主要的两大生物活性成分,已应用于医药、化妆品、保健品等行业。本论文主要研究内容和结
茶树品种是决定成茶品质的重要因素,茶树种质资源是新品种选育的物质基础,紫芽茶树作为一种高花青素含量的优异性茶树资源,了解紫芽茶树花青素谢调控的遗传机制对提高特色紫芽茶树品种的选育和高花青素茶叶产品的开发具有重要意义。因此,本论文以大厂茶（Camellia tachangensis F.C.Zhang）不同品系（紫芽品系P113和绿芽品系P114）以及在不同季节时期的紫芽品系P113为研究材料,在测
二氧化碳（CO2）是一种丰富、廉价且无毒的C1资源,可作为合成高附加值化学品的基础材料。然而,由于CO2的动力学惰性和热力学稳定性,使得CO2的高效利用受到限制。发展有效的CO2捕获、储存和利用（CCSU）技术是解决过度碳排放行之有效的方法。于此,本文立题于CO2分离与转化,首先综述了几种有潜力的CO2分离与转化的功能介质,然后针对功能介质分离CO2拟需解决的高温下CO2分离效率低、分离介质稳定性
草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda（J.E.Smith）,隶属于鳞翅目、夜蛾科,是世界性的重大迁飞性农业害虫。其具有分布范围广、寄主多、迁飞扩散能力和繁殖能力强等特性。2019年入侵我国,随后迅速席卷国内多个省市,对我国的玉米、水稻、小麦等粮食作物的生产造成了严重威胁。本研究以草地贪夜蛾为试验材料,测定了草地贪夜蛾的自残行为,并对不同食料喂养的草地贪夜蛾生长发育、体内能源物质、飞
黑皮鸡枞是贵州省重要的珍稀食药用菌栽培品种,年种植量达1.6亿棒,但由于栽培面积和栽培年限的增加,病害日趋严重。其中蛛网病是黑皮鸡枞的重要病害之一,经调查黑皮鸡枞主要栽培区,其平均发病率可达22%,造成重大的经济损失,急需有效的防治措施。本研究对贵州省黑皮鸡枞蛛网病病原菌进行了分离纯化及鉴定,探究其生物学特性及致病范围,并在此基础上对蛛网病的防治方法进行了探索,以期获得有效的防治药剂和方法。具体结
传统的命名实体识别方法通常采用分类的方法对句子中的每个词进行分类。通过分类标签识别单词在命名实体中的语义角色,如:实体的开始、实体的结束等。为了获取句子的结构特征,传统方法采用序列标注模型（如,隐马尔科夫、条件随机场、循环神经网络等）输出一条最大化的标签序列。其不足之处在于文本中存在大量的嵌套实体。在嵌套实体中,一个单词可能同时属于多个实体,具有多个标签。输出一条最大化的标注路径无法识别嵌套的命名
随着科技革命和产业变革加速发展与疫情进入常态化防控的现状,医疗配送自动导引运输车（Automated Guided Vehicle,AGV）以其高效性、灵活性、低交叉感染风险等优势在国内外医院大量推广,传统设计方法已无法满足个性多样的用户需求及高效的产品开发需求。因此,越来越多AGV开发企业将有限的资源投入到满足用户关键需求的快速准确、人性化的设计方法中。本文针对医护人员对医疗配送AGV的多维度需
白术为菊科苍术属多年生草本植物,是大宗药材之一。药用价值高,市场需求量大。本研究以白术为研究对象,设置4个施氮水平（记为N1、N2、N3、N4）,以不施氮（N0）为对照,进行白术单作（记为M）、白术-紫云英间作（记为I）两种种植模式下氮肥减施试验,探究两种种植模式下施氮量对白术农艺性状、叶片酶活性和叶绿素含量、养分积累、产量、品质、根部土壤养分和酶活性的影响。以期为白术的氮肥减施增效提供参考。结果
黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus,CMV）引起的黄瓜花叶病毒病、辣椒花叶病毒病和烟草花叶病毒病等病害对经济作物造成了巨大的经济损失。目前,没有有效的抗CMV药剂防治该病毒引起的病害,寻找CMV致病的分子靶标是创制抗CMV药剂的关键所在。因此开展CMV潜在分子靶标的发掘对于抗CMV药剂的研发和创新具有重要意义。本论文以CMV 2b蛋白作为潜在的分子靶标,通过原核表达获得CMV
耐镉（Cd）型马铃薯“云薯505”中保守的寡肽转运蛋白（OPTs）被Cd胁迫诱导,具有对底物长距离运输的能力,然而其对Cd的选择性转运和区隔化解毒的功能尚不明确。因此,本研究通过对马铃薯OPT基因家族成员进行鉴定,根据生物学等11个结果筛选关键基因StYSL12,进行细胞生物学和遗传学实验,以探究马铃薯OPT基因家族成员的结构特征、特异性表达模式、真核细胞内Cd积累和植株体内耐受能力。主要研究结果