解淀粉芽孢杆菌Rdx-5次生代谢产物的分离与活性成分分析

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水稻稻瘟病是影响水稻生产的三大病害之一,严重影响水稻的产量与品质。一般来说,预防和治疗稻瘟病的传统方式是化学防治。但过度使用化学农药会对人类的健康产生极大的危害,也会对生态环境造成严重的污染。目前,主要以筛选抗性品种和栽培手段相结合的方法进行防治。近年来,利用天然产物生化制剂与生.物农药等生防手段也展现出了广阔的前景。我们在中药材上发现了一株对稻瘟病菌具有显著抑制效果的新菌株,命名为Rdx-5。随后对该菌株进行了比较深入的研究,并对其在发酵过程中产生的次生代谢产物进行了纯化与鉴定。Rdx-5菌呈长杆状,稀疏周生鞭毛,有运动性,革兰氏阳性菌。在PDA培养基平板上培养24 h后单菌落的边缘不规则,表面略粗糙,呈浅黄色。菌株具有解淀粉作用,通过镜检发现该菌株产生巨大芽孢。经过16SrDNA测序比对鉴定其为解淀粉巨大芽孢杆菌。Rdx-5产生的抑菌成分在100 ℃下处理30 min后仍然有很强的抑菌效果。此外,在强酸性、中性、弱碱性环境中处理24 h也不会改变其抑菌效果。但在强碱性条件下,抑菌效果明显下降。我们通过沉淀法、柱色谱法、高效液相色谱法对菌株Rdx-5的抗菌物质进一步分离和纯化,最终得到了化合物A并测定了分子量是364.26。通过分子量数据库检索,没有发现该成分在小数点后四位2分以下相差的相关报道。推测该物质为新的化合物。该物质具有自主知识产权,可以申请相关专利。模拟大田试验研究发现不同浓度的菌液和过滤火菌发酵液对稻瘟病的防治作用均具有显著效果,并同时发现预防效果明显优于治疗效果。我们推测该菌可以定植于水稻植株表面并继续产生抗生素。因此,该菌除了可以生产稳定可靠的抗生素外,还可以作为生防菌用于稻瘟病防治。
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