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玉米胚乳中存在着大量与淀粉合成酶、醇溶蛋白合成酶、谷蛋白合成酶相关的基因,并且有部分受胚乳特异性启动子调控,只在胚乳中特异性表达。随着转基因技术的快速发展及转基因研究领域的不断扩大,对组织特异性启动子的研究逐步受到重视。本研究旨在从玉米自交系18-599红中克隆淀粉合成酶基因ZMGBSS,谷蛋白基因ZMGT1、SC3以及醇溶蛋白基因ZEIN、BN15D14A的启动子GBSS, GT, SC, ZEIN, BN,对其表达的组织特异性及外界诱导因素进行分析,构建了这些启动子的瞬时表达载体,利用基因枪法通过转化胚乳,分析其启动活性。研究结果如下：1、利用高保真酶KODFx从玉米自交系18-599红基因组DNA成功克隆出2000bp左右的胚乳特异性启动子GBSS, GT, SC, ZEIN, BN序列,并对克隆片段进行回收测序。将测序结果与NCBI上B73的基因组信息比对,其相似性分别为97%、99%、99%、97%和99%。2、提取玉米自交系18-599红授粉15天后的胚乳和胚以及出苗10天后的根和叶的RNA,反转录成cDNA,以18s rRNA作为内参对ZMGBSS, ZMGT1、SC3、 ZEIN, BN15D14A基因进行半定量PCR分析,结果表明,ZMGBSS和ZEIN在胚乳的表达量明显高于在其他组织。而ZMGT1、SC3、BN15D14A没有表现出明显的组织特异性。3、通过荧光实时定量PCR对基因ZMGBSS、ZMGT1、SC3、ZEIN, BN15D14A受外源激素诱导后的表达进行分析,结果表明,ABA诱导可导致基因ZMGBSS和ZEIN的表达量明显提高。蔗糖诱导可导致基因ZMGT1和BN15D14A的表达量明显提高。4、构建了启动子GBSS、GT、SC、ZEIN和BN的瞬时表达载体,即pGBSS-Luc、 pGT-Luc、pSC-Luc、pZEIN-Luc和pBN-Luc,同时构建了瞬时表达载体pUbi-Luc作为对照,构建了瞬时表达载体pUbi-Gus作为内参,内参对照主要用来消除不同转化所导致的差异。将内参载体与目的载体按照质量比为1：4的比例混合,基因枪转化,转化材料为4小时预处理过后的授粉15天后18-599红的胚乳。结果表明,启动子GBSS、ZEIN和BN的启动活性相对高于SC和BN,但均明显低于组成型启动子Ubiquitin。5、在外源因素诱导表达分析中,转化受体材料分别为葡萄糖、蔗糖、ABA和GA诱导4h后的胚乳,利用基因枪转化法,按照内参载体与目的载体以1：4的比例混合进行转化,结果表明,受到ABA诱导的启动子GBSS、ZEIN活性有明显提高,受到蔗糖诱导的启动子GT、BN活性也有一定的提高,但启动子SC却表现为受所有供试处理抑制。