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目的：过去几十年，糖尿病（diabetes mellitus，DM）和糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)的发病率快速上涨，成为了中国医疗体系中重大的经济负担。糖尿病肾病，作为糖尿病的主要并发症，是导致终末期肾病(end-stage renal disease，ESRD)的主要原因[1]。由于临床DN一旦发生，肾脏损害发展速度较快，当前尚缺乏有效的治疗方法，绝大多数患者都在较短时间内进入ESRD。因此必须在早期，即肾病尚处于第Ⅰ一Ⅲ期就给予针对性的防治，才有可能控制和延缓肾脏病的进一步发展[2]。反应停（沙利度胺，Thalidomide）早期主要用于抑制妊娠妇女的早孕反应，但因其强烈的致畸作用而被禁止使用，近年来大量的研究发现，反应停具有抗炎、抗血管新生、免疫调节等作用，在骨髓移植、多发性骨髓瘤方面已取得较好的疗效。本实验通过予糖尿病肾病小鼠以反应停治疗，观察反应停治疗糖尿病肾病的疗效，并通过观察糖尿病肾病小鼠用药前后的变化，研究反应停的作用机制，为其治疗糖尿病肾病的作用机制提供重要依据。方法：1.C57BL/6雄性小鼠24只，16W，28-32克；db/db雄性小鼠24只，16W，59-70克；SPF级动物房饲养。普通饲料喂养8周后，分为4组：a.正常对照组（WT组）b.正常对照+反应停组（WT+T组）c.糖尿病肾病模型组（db/db组）d.糖尿病肾病+反应停组（db/db+T组），每组12只，分别予生理盐水、反应停100mg/kg/d灌胃，共灌胃8周。2.每周测量血糖、体重1次，留取24小时尿液测量尿量、尿微量白蛋白。3.灌胃8周后处死，留取肾脏组织，行PAS染色、免疫组化染色、透射电镜、western blot、real-time PCR检测。4.所有计数结果用SPSS17.0软件进行统计分析。结果：1. C57BL/6与db/db小鼠适应性喂养8周后，db/db组较WT组血糖、体重、尿白蛋白显著升高(P<0.01)，尿量较WT组轻度增加（P>0.05），提示db/db小鼠糖尿病肾病模型建立。2.灌胃结束后，db/db+T组小鼠体重较db/db组有所下降，WT+T组较WT组体重也有所下降，但均无统计学差异(P>0.05)。db/db+T组灌胃后体重较灌胃前显著降低（P<0.05）。db/db+T组小鼠血糖较db/db组有所上升，WT+T组较WT组血糖也有所上升，但均无统计学差异(P>0.05)。db/db+T组灌胃后血糖较灌胃前降低（P>0.05）。db/db+T组小鼠尿量较db/db组有所增加，WT+T组较WT组尿量也有所增加，但均无统计学差异(P>0.05)。db/db+T组灌胃后尿量较灌胃前降低（P>0.05）。db/db+T组小鼠尿白蛋白较db/db组有所减少（P<0.01），WT+T组较WT组也有所减少，但无统计学差异(P>0.05)。db/db+T组灌胃后尿白蛋白较灌胃前显著降低（P<0.05）。因此考虑反应停对于小鼠体重的降低、蛋白尿的缓解起一定作用(表2、图5)。3.PAS染色可见：WT组、WT+T组：肾小球、肾小管、肾间质未见异常表现。db/db组：肾小球体积增大，肾小球基底膜增厚，系膜细胞及系膜基质增生。db/db+T组：与db/db组相比，肾小球体积缩小，系膜基质增生减少。4.透射电镜观察可见：WT组、WT+T组：肾小球无异常，足细胞形态清晰，结构完整。db/db组：肾小球基底膜不同程度增厚(P<0.01),足突增宽，融合甚至消失。足细胞数量减少。db/db+T组：与db/db组相比，足细胞骨架结构得到修复，足细胞数量恢复，足突宽度变小。5.免疫组化染色可见：与WT组比较，db/db小鼠肾小球内PTEN表达降低（P<0.05）,以系膜区和基底膜明显。db/db+T组PETN表达较db/db组上调（P<0.01）。与WT组相比，db/db组肾小球内α-SMA、FN、Col Ⅳ表达上调（P<0.05）。db/db+T组α-SMA、FN、Col Ⅳ表达较db/db组降低（P<0.05）。6.Western-blot结果显示，与WT小鼠相比较，DN小鼠PTEN表达下调（P<0.01），反应停可以增强PTEN的表达（P<0.05）。与WT正常对照组比较，db/db组肾脏组织α-SMA、FN、Col Ⅳ蛋白表达显著升高（P<0.01，P<0.05，P<0.01）。与db/db组比较，db/db+T治疗组α-SMA、FN、Col Ⅳ蛋白表达水平下调，二者差异有统计学意义（P<0.01，P<0.01，P<0.05）。7.Real-time PCR结果显示,与WT组比较，db/db组PTEN下调，反应停灌胃后，db/db+T治疗组PTEN水平较db/db组上调。与WT组比较，db/db组肾脏组织a-SMA mRNA表达明显升高(P<0.01)；与db/db组比较，db/db+T治疗组α-SMA mRNA表达水平下调，二者差异有统计学意义（P<0.01）；WT+T治疗组α-SMA mRNA表达无明显差异（P>0.05）。相似的，与WT组比较，db/db组FN水平显著上升(P<0.05)；反应停治疗后，db/db+T组FN水平较db/db组明显下调（P<0.05）。此外，与WT组比较，db/db组Col ⅣmRNA水平上升(P>0.05)；反应停治疗后，db/db+T组Col ⅣmRNA水平较db/db组下调（P>0.05）。结论：1.反应停可增强PTEN的表达2.反应停可防治糖尿病肾病。