siRNA-Survivin对SiHa细胞增殖及凋亡影响的研究

来源 :延边大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Water_E
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子宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一,是位居全球第二的威胁妇女生命的恶性肿瘤,仅次于乳腺癌。据统计,我国每年新增病例为13.15万,约占全球总数的1/3。而且宫颈癌的发病呈现年轻化趋势。survivin基因表达产物是 Ambrosini等在1997年发现的一种新型凋亡抑制因子,属于凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis proteins,IAP)家族成员之一。survivin是IAP家族中分子量最小的成员,是迄今发现的最强凋亡抑制因子。研究表明survivin基因的表达具有高度特异性,成年人的正常组织不表达,而胚胎组织和多种肿瘤组织中表达广泛,且肿瘤组织中survivin基因的表达与其恶性程度和患者的预后密切相关。survivin的分子生物学、组织分布特征、凋亡抑制机制及其与肿瘤的发生、发展、细胞周期的关系引起了研究者的广泛关注,并已取得一定进展。  本研究主要针对人体正常宫颈组织、CINⅢ组织及宫颈癌组织,通过Western blotting和免疫组化的方法检测Survivin蛋白在宫颈组织中的表达,验证Survivin蛋白与宫颈癌发生的关系。并采用人宫颈癌SiHa细胞系,以RNA干涉的手段抑制survivin基因的转录和表达,观察survivin基因沉默后对SiHa细胞增殖及凋亡的影响,并进一步通过检测凋亡相关蛋白Caspase-9的表达与Caspase-3的表达激活情况,探讨siRNA-survivin对SiHa细胞系的作用机制。  研究结果显示,与正常宫颈组织及CINⅢ相比,人宫颈癌组织中Survivin蛋白表达明显增高。SiHa细胞转染pU6-siRNA-survivin重组质粒后,细胞中survivin基因的转录与表达下调,SiHa细胞的增殖受到抑制,细胞周期停滞于S期,细胞凋亡增加,Caspase-9的表达上调,Caspase-3的表达与激活增加,提示RNA干涉survivin后,可能通过增强凋亡通路中Caspase家族的活化,从而发挥促进细胞凋亡的作用。  本实验研究证实Survivin蛋白在宫颈癌的发病中具有重要作用,以RNA干涉技术沉默 survivin基因的转录与表达,可有效抑制宫颈癌细胞的增殖,促进宫颈癌细胞的凋亡。本研究为子宫颈癌的基因治疗提供了新的思路,奠定了理论依据和实验基础。
其他文献
笔者曾经在某个报刊上看过这样的一则故事:一位父亲在农闲时常常带着上小学的儿子去池塘摸鱼。摸鱼前,他吩咐儿子摸鱼时不要弄出声响,如果弄出声响,鱼就会往深水处逃窜。有一天黄昏,儿子独自一人去池塘摸鱼,竟摸回半篓鲫鱼。父亲忙问是怎么摸的,儿子说你不是说鱼一受惊就会往深水游吗?所以我先在池塘中央弄一个深水坑,再从塘四周扔一些小石块,鱼就跑到我挖的深水坑里,我只管一个劲地“守坑待鱼”就行了。  从这则故事中
期刊
目的:本研究通过对急性炎性内脏痛大鼠鞘内注射芬太尼,探讨芬太尼对急性炎性内脏痛大鼠DRG神经元Nav1.8通道影响的机理,为芬太尼在内脏痛治疗的临床应用提供指导。方法:将32只雄性SD大鼠,随机分为4组(n=8),根据鞘内和腹腔注射药物不同分别为:空白对照组(NS组)、生理盐水组(AS组)、芬太尼组(F组)、纳洛酮组(N组)。大鼠分别称重,腹腔内注射3.5%水合氯醛10ml/kg麻醉,钝性分离大鼠