在儿科,以往的研究已证实人类呼吸道合胞病毒(hRSV)、流感病毒、副流感病毒及腺病毒是下呼吸道感染的主要病原,仍有约1/3的病原不明。2001年荷兰学者Hoogen等报告他们发现了一类与人类,特别是婴幼儿呼吸道感染有关的新的病毒—人类偏肺病毒(human metapneumovirus,hMPV)。目前hMPV感染在世界各地相继有报道,提示该病毒是世界范围内普遍存在的人类致病原。因此,有必要在各地区对其临床流行特征作调查。呼吸道病毒感染的诊断有四种主要方法,包括病毒的分离培养、抗原检测、RNA或DNA检测、血清学检测。在过去的研究中,病毒的分离培养、RT-PCR、血清学检测已用于hMPV感染的诊断。病毒分离培养虽然特异性高,但是hMPV尚未发现最适生长的细胞。血清学检测能区别hMPV原发感染与再次感染,但是不能早期诊断hMPV感染。因此,RT-PCR被认为是目前最敏感及特异的诊断方法,但是需在特殊实验室才能完成,且需6小时以上才能获得结果。免疫荧光法与酶联免疫特异性测定(ELISA),这两种快速检测抗原的方法是可行的。已有报道小鼠抗hMPV多克隆抗体的ELISA方法检测培养的hMPV感染细胞的hMPV抗原,然而,对临床标本的hMPV抗原检测尚乏研究。呼吸道上皮细胞的免疫荧光法检测已证实对其它的呼吸道病毒(如呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒、副流感病毒)是一种非常有效的方法。关于间接免疫荧光抗体法(IFA)检测鼻咽分泌物中hMPV抗原国内未见报道。而且,IFA适用于hMPV感染早期诊断,简便快速,易在临床上广泛应用。因此,我们用IFA法诊断hMPV感染并调查西安地区hMPV的临床流行特征。方法收集2006年11月至2007年2月我院儿科中心的112例急性呼吸道感染住院患儿的鼻咽分泌物标本,患儿入院后48h内用无菌拭子采集鼻咽分泌物,立即置于冰上,迅速转运至实验室。用直接免疫荧光抗体法(DFA)检测常见的7种呼吸道病毒(包括呼吸道合胞病毒,甲、乙型流感病毒,I、II、III型副流感病毒和腺病毒),对其中65例常见7种呼吸道病毒特异性抗原阴性患儿鼻咽分泌物用IFA法检测hMPV抗原。所有患儿的临床资料包括性别、年龄、临床表现、实验室检查在出院后作病案回顾性分析。结果1.在×400放大的荧光显微镜下1滴细胞涂片中至少有100多个上皮细胞,阳性结果为至少1个细胞有特异性染色(明亮的黄绿色荧光)。2. hMPV检测阳性率65份标本中用IFA方法检测hMPV阳性数8例,阳性率为12.31%。其中2006年11月份阳性检出率为14.29%(3/21),12月份为11.76%(2/17),2007年1月份为15.79%(3/19),2月份未检出(0/8)。3.年龄组感染率8例感染患儿中男5例,女3例,年龄范围6个月~5岁9个月。儿童中≤5岁年龄组40例,阳性6例,感染率为15%;6～14岁年龄组25例,阳性2例,感染率8%,两年龄组hMPV感染率差异无统计学意义(χ2 = 0.7,P > 0.05)。4.临床表现及实验室检查8例阳性患者中75%的表现有发热(≥38.0℃),87.5%有咳嗽,37.5%气喘。其中≤5岁年龄组6例中有6例咳嗽、4例发热、3例气喘; 6～14岁年龄组2例中有2例咳嗽、2例高热、1例咽痛、1例惊厥。2例肺炎患儿X线胸片显示双肺野斑点或斑片状渗出阴影,肺部听诊可闻及湿啰音。4例患儿CK-MB异常。所有患儿均好转或治愈出院。5.临床诊断临床诊断肺炎者为2例,喘息性支气管炎为1例,支气管炎为4例,上感为1例。≤5岁年龄组6例中有2例肺炎、3例支气管炎、1例喘息性支气管炎;6～14岁年龄组2例中有1例支气管炎、1例上呼吸道感染。结论1.我们的研究表明用抗hMPV的小鼠单克隆抗体进行IFA能检测到鼻咽分泌物中的hMPV抗原。IFA适用于hMPV感染早期诊断,简便快速,4h出结果,易在临床上广泛应用。在本研究中,我们证实IFA对hMPV感染诊断是一种快速且有效的方法。2.本研究结果显示hMPV在常见7种呼吸道病毒检测阴性的呼吸道标本中阳性率为12.31%,提示本研究中hMPV与患者的急性呼吸道感染有关,这说明西安地区儿童也存在hMPV感染,hMPV同样是国内呼吸道感染儿童重要的病原体。3.感染率的差异可能与研究时期、研究人群及地域不同有关。而且,目前的研究可能低估了该病毒的感染率,因为研究是在常见7种呼吸道病毒阴性的标本中再检测hMPV。4.我们的研究表明hMPV可引起6月-6岁年龄段儿童的感染,其中5岁及以下患儿占75%。易感人群年龄分布的差异可能还与纳入研究对象选择不同有关。5.本研究对hMPV的检出高峰主要在11月及次年1月,其流行病学特征还需进一步监测。6. hMPV感染的临床表现有轻有重,可引起上或下呼吸道感染,最常见的症状为咳嗽、发热、喘息。