减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207asd基因突变株的构建及其生物学特性

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鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)是一种肠道致病菌,它是一种胞内侵袭性细菌。利用侵袭性胞内细菌作为载体传递外源抗原基因疫苗是目前基因免疫研究的热点之一。它可将质粒DNA直接呈递给抗原提呈细胞(APC),携带质粒DNA的细菌在APC细胞内发生溶解或以宿主吞噬小体为桥梁进入胞质,并将DNA释放到细胞核,使抗原基因在体内进行表达而诱导相应的细胞免疫和体液免疫反应。通过各种方法减毒的沙门氏菌,虽然失去了对动物的致病性,但不影响其在体内的繁殖和侵袭能力。SL7207是其中的一种,它是由一个基因,即aroA基因的突变构建的减毒株。SL7207因其aroA基因的突变,自身不能合成需要的芳香族氨基酸,必须从外界获取芳香族氨基酸才能生长,而哺乳动物体内不含有该类氨基酸,使得SL7207在哺乳动物体内生长受限,从而达到了减毒的目的。减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207是DNA疫苗常用的载体工程菌,asd (aspartic semialdehyde dehydrogenase)基因所编码的天冬氨酸半醛脱氢酶,是细菌赖氨酸、苏氨酸、蛋氨酸和二氨基庚二酸( diaminopimelic acid ,DAP)合成途径中的一种关键酶,而DAP是革兰氏阴性菌细胞壁主要成分。当asd基因发生突变时,细菌不能自行合成DAP ,菌体就融解死亡,所以其生长依赖DAP的外部加入。本研究通过同源重组的方式,构建了鼠伤寒沙门氏菌SL7207 asd基因突变株SL7207(asd-),并通过比较SL7207与SL7207(asd-)在体内、体外的生长、增殖情况,对SL7207(asd-)的部分生物学特性进行研究。
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