固定化(酵母)细胞技术的研究

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本项研究以酿酒酵母为固定化细胞的研究对象,在传统的固定化细胞技术的基础上,较系统地研究了制备强度性能好、通透性好、传质阻力小的颗粒状固定化酵母细胞的方法,并对所制备的固定化细胞的性能及发酵工艺进行了初步研究。   用单一载体制备的固定化细胞的强度,韧性等均不理想。添加填充物质可改善载体的强度,但效果不明显。在采用混合载体制备固定化细胞后,颗粒强度有明显改善,其中使用1.5海藻酸钠:7PVA的混合载体材料可制备强度高、韧性好的小球状固定化细胞颗粒。但所制得颗粒的通透性较差,本文研究了改善细胞通透性的两类方法:一类是将载体细胞悬浮液滴入2%(w/w)氯化钙溶液中成型后,立即转入3%(w/w)的硼酸无菌溶液中硬化24h的分阶段硬化方法,可以有效改善固定化细胞颗粒网格的紧密程度,得到通透性好的固定化细胞颗粒。另一类方法是用PO43-来处理固定化细胞的通透性,其中将硬化好的固定化细胞颗粒在0.8mol/l磷酸二氢钾的无菌溶液中处理24h的方法效果较好。   通过对固定化细胞增殖培养条件的优化得出:1:1的麦芽汁与薯糖汁比例,体积150ml的增殖液,在28℃,120r/min的条件下活化24h较好。在发酵中的最佳产酒条件为:15%(v/v)的固定化酵母细胞添加量,31℃条件下发酵42h。对固定化酵母细胞性能进行的初步测试,得出经本研究方法制备的固定化酵母细胞产酒的最适PH、温度范围比游离态酵母细胞的宽,对环境的抵抗能力较强。固定化酵母细胞可多批次的反复发酵,颗粒强度及韧性保持较好,产酒率变化不大,细胞的稳定性较好。
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