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目的:探讨细胞凋亡和肺缺血再灌注损伤的关系及红花注射液对凋亡及其相关基因的影响。
方法:健康日本大耳白兔84只,随机分成7组:对照组(C组)、缺血再灌注1h(IRlh)组、3h(IR3h)组、5h(IR5h)组、缺血再灌注+红花注射液1h(S工1h)组、3h(S13h)组、5h(S15h)组。麻醉后左侧开胸,游离肺门,过阻断带,复制原位单肺缺血再灌注模型。C组为过阻断带后不结扎,观察4h留置标本;IR组为阻断左肺门缺血Ih,然后松开阻断带分别再灌注1h、3h、5h留置标本;SI组分别在缺血前20min及再灌注即刻静脉注射红花200mg/kg,其余同IR组。实验结束取部分左肺组织测湿/干重比(W/D);采用原位末端标记法检测肺组织凋亡指数(AI);免疫组化学、原位杂交测定肺组织Bcl一2、Bax及caspase一3的表达;光镜、电镜下观察肺组织形态结构变化,并测定肺损伤组织学定量评价指标(IQA)。结果:1.IR各组w/D及IQA随再灌注时间延长逐渐升高,且与C组相比均有统计学意义(/KO.01);SI各组与IR组对应时间点相比明显下降(均t2<0.01)。
2.IRlh组肺组织细胞AI明显高于C组([K0.01),IR3h组高于IRlh组(tK0.01),IR5h组较IR3h组有增高的趋势但无统计学意义;SI各组与IR组对应时间点相比同样明显下降(均P<0.01)。凋亡细胞主要为肺泡上皮细胞和血管内皮细胞。
3.IR各组肺组织Bcl一2和Bax的表达较C组明显上调(均/2<0.01)。阳性细胞主要分布于血管内皮细胞及肺泡上皮细胞,少量表达于支气管上皮细胞。IR组再灌注期间,Bax的表达随时间延长逐渐增加(P<0.05);与IR组相同时间点比较S工组Bax的表达显著下降(均F<0.01)。工R组随再灌注时间延长Bcl一2先升高而后下降(均P
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期刊
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