目的:观察不同浓度的神经生长因子(NGF)和重组骨形态发生蛋白(rhBMP)分别及联合作用对体外培养的人牙周膜细胞(PDLCs)增殖及碱性磷酸酶(ALP)活性的作用。为生长因子应用于临床牙周病的治疗提供理论基础。方法:(1)体外传代培养人牙周膜细胞。(2)采用四唑盐比色法(MTT)和酶动力学方法,观察不同浓度的神经生长因子和重组骨形态发生蛋白分别及联合作用对体外培养的人牙周膜细胞增殖及碱性磷酸酶活性的作用。(3)动态观察神经生长因子和重组骨形态发生蛋白联合作用对人牙周膜细胞的促增殖影响。结果:(1)NGF和rhBMP分别及联合作用均能促进PDLCs的增殖(P<0.O5),NGF的最佳作用浓度为10U/ml,rhBMP的最佳作用浓度为200ng/ml。NGF(10)+rhBMP(200)(最佳浓度之和)促PDLCs作用较其分别作用更加显著(P<0.01)。(2)NGF和rhBMP分别及联合作用均能促进PDLCs的碱性磷酸酶活性(P<0.O5),NGF(10)+rhBMP(200)(最佳浓度之和)促PDLCs的碱性磷酸酶活性作用较其分别作用更加显著(P<0.01)。(3)动态观察NGF和rhBMP分别及联合作用于PDLCs 1——9d,显示出前6天与对照组比较各组具有显著性差异(P<0.05),而第九天与对照组比较各组则没有显著性差异(P>0.05)。表明其促增殖作用并不是呈现连续递增趋势。结论: NGF和rhBMP分别及联合作用均能促进人PDLCs的增殖和碱性磷酸酶活性,NGF和rhBMP联合作用能更显著地促进人PDLCs的增殖和碱性磷酸酶活性。其中NGF(10) + rhBMP(200)为最佳显效浓度。动态观察NGF(l0) + rhBMP(200)作用于人PDLCs 1——9d,其促增殖作用并不是呈现连续递增趋势。