水蛭素体外抗鼻咽癌细胞的初步研究

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目的:探讨水蛭素(Hirudin)抑制人鼻咽癌(Nasopharyngeal Carcinoma,NPC)CNE2细胞的增殖和诱导凋亡的作用及其相关机制。  方法:以人鼻咽癌低分化细胞株CNE2细胞为研究对象,采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度水蛭素对CNE2细胞株在不同时间段的增殖抑制率,计算出不同时间段的IC50;采用流式细胞术检测水蛭素作用于CNE2细胞24h和48h后的凋亡率;采用流式细胞术检测水蛭素作用于CNE2细胞24h后细胞周期的变化;采用实时荧光定量PCR检测水蛭素作用于CNE2细胞24h后Bax和p21mRNA的变化。  结果:各浓度水蛭素对CNE2细胞有明显的增殖抑制作用,抑制作用随水蛭素浓度和作用时间的增加而逐渐增强(P<0.05);水蛭素对CNE2细胞在24h、48h和72h的IC50分别是(8.28±2.1) ATU/ml、(5.11±0.7) ATU/ml和(4.23±0.5)ATU/ml;流式细胞学检测结果显示,水蛭素具有诱导CNE2细胞凋亡的作用,提高水蛭素作用浓度后,凋亡率也明显增加(P<0.05),相同浓度的水蛭素随着作用时间的延长,凋亡率也相应地上升(P<0.05);流式数据证明水蛭素使CNE2细胞周期阻滞于G2/M期;实时荧光定量PCR检测结果提示水蛭素可以上调Bax mRNA和 p21mRNA表达水平(P<0.05)。  结论:研究表明水蛭素可以明显抑制人鼻咽癌CNE2细胞的增殖,导致CNE2细胞在G2/M周期阻滞,结合实时荧光定量PCR结果,其周期阻滞可能与水蛭素上调p21mRNA表达有关。同时水蛭素可能通过上调Bax进一步诱导凋亡。
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