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本研究选用对葡萄霜霉菌免疫的圆叶葡萄(Muscadine rotundifolia)品种’Noble’、中抗的山葡萄(Vitis amurensis)品种‘左山一’,和感病的欧亚种(Vitis vinifera)葡萄品种‘汤姆森无核’为材料,分别克隆得到其转录因子WRKY30,并对基因的基本特性进行分析比较。结果表明,三个WRKY30基因均含有1050个编码碱基,编译349个氨基酸,含有核定位序列’KKRK’,锌指类型为’CCHC’,为Ⅲ型的WRKY转录因子,WRKY结构域的相似性为100%。序列比对与进化树分析葡萄VRKY30与已研究过的葡萄WRKY基因相似性都低于40%,亲缘关系较远,属于不同的WRKY转录因子。为确定葡萄WRKY30行使功能的细胞器,本试验对WRKY30进行了亚细胞定位。以洋葱表皮细胞为材料,用基因枪将构建亚细胞定位载体pH7FWG2,0_WRKY3和对照载体pH7FWG2,0_AttB进行转化。结果表明WRKY30作用于细胞核,可能为DNA绑定转录因子。将WRKY30导入拟南芥并得到纯合体。对其功能进行研究发现,WRKY30基因对种子萌发率、抗旱性、叶片失水率没有影响,但它可以抑制抗坏血酸过氧化物酶(AtAPX)、过氧化氢酶(AtCAT)和谷胱甘肽转移酶(AtGST)的表达来增强对高盐的敏感性。同时WRKY30还可以增强植株的耐寒性,与低温相关的C-重复绑定因子(AtCBF1、 AtCBF3)、冷调控基因47(AtCOR47)和CBF表达诱导因子1(AtlCEl)的表达量也有提高。此外,WRKY30转基因拟南芥对霜霉菌的抗性能力也有提高,与此同时病程相关蛋白(AtPR1、AtPR4,AtPR5和AtPDF1.2)以及与植物激素信号途径相关基因促进感病因子5(AtEDS5)和茉莉酮酸抗性因子1(AtJAR1)的表达量均有上升,由此推测WRKY30是通过水杨酸(SA)信号通路诱导AtPR5的上调,通过茉莉酸(JA)而不是乙烯(ET)信号通路来诱导AtPDF1.2的表达。本研究还表明,WRKY30受到霜霉菌的诱导,抗病葡萄品种WRKY30的基础表达量高于易感品种,以‘左山一’WRKY30的表达量最高。用不同植物生长调节剂脱落酸(ABAX SA.茉莉酮酸甲酯(MeJA)、以及乙烯利处理后,不同抗性的葡萄品种中WRKY30的表达是受到诱导或是抑制因品种而异。为确定葡萄WRKY30所调控的PR基因,首先构建原核表达载体pET30a_WRKY30。表达并纯化WRKY30蛋白,再经凝胶阻滞试验确定其能够与W-box原件结合。通过启动子分析得到类甜蛋白TLP2-7、 TLP2-8、 TLP8-1、 TLP8-3、 TLP13-1、 TLP186个候选基因。结果显示,对霜霉菌中抗的山葡萄品种‘左山一’的TLP2-7和TLP2-8表达量上调。农杆菌瞬时转化pH7WG2D_WRKY30后,TLP2-7和TLP2-8的表达量也是升高的。经霜霉菌处理,转化WRKY30叶片的菌株生长受到抑制,且TLP2-7的表达量进一步升高,所以WRKY30可能通过调节TLP2-7的表达来增强其对霜霉菌的抗性。