补肾祛毒汤的临床观察及对慢性肾功能衰竭大鼠TGF-β1/Smads信号转导通路影响的实验研究

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目的:本课题分临床观察及动物实验两部分,临床观察部分通过收集病例观察补肾祛毒汤的临床疗效;动物实验部分则通过实验研究观察补肾祛毒汤对腺嘌呤致慢性肾功能衰竭大鼠的肾脏功能、肾脏组织形态及TGF-β1/Smads信号转导通路的影响,探讨补肾祛毒汤延缓慢性肾功能衰竭进展及抗肾间质纤维化的机理。方法:临床部分:收集2012年1月~2013年1月福建省第二人民医院肾内科门诊及病房的慢性肾衰患者60例,按照就诊先后顺序随机分成治疗组(30例)和对照组(30例)。治疗组予常规西药+补肾祛毒汤治疗,对照组予常规西药+尿毒清颗粒治疗,2个月为一疗程,观察1个疗程。对比治疗前与治疗2个月后患者的血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、肌酐清除率(CCr)、尿TGF-β1指标的变化。实验研究部分:将76只大鼠随机分为分为6组:正常组、模型组、尿毒清组、贝那普利组、补肾祛毒汤炮山甲组及补肾祛毒汤龟甲组,采用腺嘌呤灌胃制作大鼠肾衰模型并给予相应灌药治疗30天后,检测各组的SCr、BUN,应用免疫组织化学法检测各组大鼠TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad6;实时荧光定量PCR检测各组大鼠TGF-β1mRNA;蛋白印迹法测定Smad2、Smad3、Smad6;病理形态学观察各组大鼠肾小球及肾小管间质病变积分。结果:补肾祛毒汤能够改善患者的肾功能,延缓肾功能衰竭进展,能明显降低慢性肾功能衰竭大鼠血清尿素氮、肌酐水平,与对照组比较有显著性差异;能降低慢性肾衰竭大鼠肾脏组织TGF-β1、Smad2/3蛋白的表达,升高Smad6蛋白的表达,与对照组比较有显著性差异;能下调肾组织TGF-β1mRNA的表达,与对照组比较有显著性差异。结论:补肾祛毒汤可能是通过升高慢性肾功能衰竭大鼠肾组织中Smad6的蛋白表达,降低Smad2/3、TGF-β1的蛋白表达,从而抑制了TGF-β1信号向细胞核内转导的通路。补肾祛毒汤通过影响TGF-β1/Smads信号通路的转导,进而减轻肾间质纤维化、延缓慢性肾衰竭进展。
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