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重瓣长寿花（KalanchoeblossfeldianaV:Poelln），又名矮生伽蓝菜、圣诞伽蓝菜，为景天科伽蓝菜属多浆植物，原产非洲马达加斯加。由于重瓣长寿花自然花期长、耐干旱、花色丰富，观赏性强，已成为一种有发展潜力的“新品种花卉”，可用于微型盆栽、大型盆栽、花坛布置等室内外栽培，其发展前景看好。重瓣长寿花不结籽，常规繁殖用扦插方法，但繁殖速度慢，易受季节影响，难以在短期内获得大量优质种苗，无法满足生产上规模化生产需要。 本实验以重瓣长寿花叶片为外植体，研究叶片以愈伤组织诱导丛生芽再生植株的快速繁殖方法。主要围绕外植体灭菌方法、外植体选择、愈伤组织诱导、愈伤组织分化和丛生芽增殖、试管苗生根培养、试管苗移栽以及培养条件等几方面进行。试验中培养方案采用正交设计，数据采用正交设计助手3.1和SPSS20.0软件分析。本文旨在通过试验，全面研究重瓣长寿花组培快繁各阶段的最佳培养基配方和关键影响因素，筛选出最优技术参数组合，逐步建立重瓣长寿花再生体系，提高重瓣长寿花商业化生产效率，为重瓣长寿花工厂化生产提供技术支持。 通过实验研究，取得以下结果: 1.重瓣长寿花最佳灭菌方法是:将叶片用75％酒精浸泡40s、无菌水冲洗2次，再用0.1％升汞浸摇4min，无菌水冲洗6次，并切成约1.5cm×1.5cm大小，接种后成活率达85％;茎段灭菌方法基本与叶片相同，区别在于75％酒精处理最佳时间为50s。 2.重瓣长寿花无叶柄叶片、带叶柄叶片、无腋芽茎段、带腋芽茎段外植体材料中，诱导丛生芽的最佳外植体为无叶柄叶片，愈伤组织致密，浓绿，出愈率达100％。 3.重瓣长寿花愈伤组织诱导的最适培养基是MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+食用白糖25g/L+琼脂8g/L，pH值5.8-6.0，最好光照处理是光照强度2000Lx，光照时间16h·d-1。接种时采用叶片远轴面接触培养基诱导愈伤组织效果最佳。 4.影响重瓣长寿花愈伤组织分化和丛生芽增殖的主要因素有:基本培养基、细胞分裂素6-BA、生长素NAA。重瓣长寿花丛生芽增殖最适培养基是MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+食用白糖25g/L+琼脂8/L，pH值5.8-6.0，丛生芽繁殖系数可达8.79。 5.影响重瓣长寿花试管苗生根的主要因素有:基本培养基、生长素NAA。重瓣长寿花生根最适宜培养基是1/2MS+NAA0.5mg/L+食用白糖25g/L+琼脂6g/L，pH值5.8-6.0。 6.重瓣长寿花试管苗在室内炼苗5-8天后，移到泥炭土∶蛭石(1∶1)基质中，成活率达96.67％以上，且小苗生长健壮。