cry1Ac基因在转基因烟草中表达调控的研究

来源 :中国科学院微生物研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yushu522216869
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该论文人改善表达调控的元件及改造Bt基因本身的结构等方面对Bt基因在转基因植物中的表达进行了研究.(1)为了研究TMV-RNAΩ片段及3UTR区对外源基因在整体植物中表达的影响,在二元表达载体pBin437的基础上,利用GUS基因及TMV-RNA非翻译区序列构建了四种GUS基因的植物表达载体,pBG437,pBG438,pBG440和pBG440ΔNOS.在这四个表达载体中,带双增强子的35S启动子分别由GUS-NOS;Ω-GUS-NOS;Ω-GUS-3UTR-NOS和Ω-GUS-3UTR组成四个不同的表达框架.经农杆菌法转化烟草获得了一志化再生植株.(2)另外?将作者实验室人工合成Bt基因的片段拼接完整,获得完整的Bt基因Cry1Ac的克隆pBtf1m.(3)将编码烟草病原相关蛋白信号肽1b(PR-1b)的DNA片段与Bt基因1m融合后,构建融合Bt基因表达载体pBS1m.对上述7组转基因植株子代T<,1>代的分析及对当代转基因植株的Southern blot分析结果表明,Bt基因已经插入到烟草的染色体基因组上,其子代卡那霉素抗性基因的分离符合孟德尔第一遗传定律.据此推测Bt基因很可能是以单拷贝的形式插入到染色体上,并且与Kn抗性基因以连锁的方式遗传.
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