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目的：对本实验室已建株抗重组人碱性成纤维细胞生长因子rhbFGF单克隆抗体杂交瘤细胞株1B2/4F2C9/1E8F11/1G9等14株细胞进一步克隆化,筛选能在体外有效抑制人神经胶质瘤细胞U87和小鼠黑色素瘤B16细胞增殖的bFGF mAb,为探明bFGF mAb的体内抑瘤效果,分析抑瘤的有效抗体识别表位,以及研究相关抗体药物提供依据。方法：采用有限稀释法,对1B2/4F2C9/1E8F11/1G9等14株杂交瘤细胞进行克隆化；小鼠体内诱生法生产腹水以获得足量bFGF mAb;间接ELISA法检测抗体效价、亲和力及Ig亚类；硫酸铵沉淀法对腹水进行初纯,Protein G亲和层析柱进行二次纯化；SDS-PAGE鉴定抗体纯度；采用MTT、CCK-8法,以U87及B16细胞为靶细胞,观察纯化bFGF mAb在体外对两种肿瘤细胞增殖的抑制作用；用光镜及荧光显微镜等方法观察纯化mAb对U87、B16和Colo细胞的形态学影响；用CCK-8法检测三株bFGF mAb与化疗药物顺铂联合使用对B16细胞和Colo细胞增殖的抑制率。结果：从14株杂交瘤细胞株中筛选出5株,分别命名为182F3A3、4F2C9A10、1E8F11B11、1G9B9和2C2H4E5;效价分别为1：128000、1：8000、1：256000、1：256000和1：128000；相对亲和力常数为1E8F11B11(4.25×109L/mol)>1B2F3A3(4.12×109L/mol) >1G9B9 (2.88×109L/mol)>2C2H4E5 (2.34×109L/mol);单抗亚类均为IgG1; 200μg/ml的单抗1B2F3A3、4F2C9A10、2C2H4E5、1G9B9和1E8F11B11对U87细胞的抑制率分别为(32.9±3.5)%、(32.7±2.3)%、(16.9±0.9)%、(0.40±2.4)%和(22.6±1.1)%,对照IgG组的抑制率为(4.02±2.3)%,P<0.05; 100μg/ml的1B2F3A3、4F2C9A10、1E8F11B11、1G9B9、2C2H4E5单抗对B16细胞的抑制率分别为(17.9±1.0)%、(13.1±2.3)%、(14.2±1.5)%、(12.5±0.9)%和(15.9±1.8)%,对照IgG组的抑制率是(3.3±2.5)%,P<0.05：单抗作用于U87、B16细胞后导致细胞形态发生变化,Annexin V/PI双染发现B16细胞出现凋亡；浓度为0.1μg/ml、0.5μg/ml、0.75μg/ml和1μg/ml的顺铂作用B16细胞96h后的抑制率分别为(9.5±2.9)%、(15.1±2.4)%、(20.1±1.9)%和(34.9±5.1)%；单抗1B2F3A3 (100μg/ml)与顺铂联合后对B16细胞的抑制率分别为(31.7±1.8)%、(35.8±1.3)%、(42.8±1.7)%和(66.2±1.8)%,P<0.05；浓度为0.1μg/ml、0.5μg/ml、0.75μg/ml和1μg/ml的顺铂作用Colo细胞96h后的抑制率分别为(44.6±4.3)%、(58.8±3.6)%、(67.0±4.6)%和(78.5±1.4)%; 100μg/ml的单抗1B2F3A3、4F2C9A10、1E8F11B11单独对Colo细胞的增殖抑制率分别为(16.3±1.4)%、(15.4±1.7)%和(12.0±2.3)%；其中单抗1B2F3A3 (100μg/ml)与顺铂联合后对Colo细胞的抑制率分别为(54.3±0.7)%、(71.1±3.0)%、(80.7±1.9)%和(84.64±0.3)%,P<0.05。结论：四株bFGF mAb能在体外抑制U87细胞的增殖,五株能抑制B16细胞的增殖,在50-200μg/ml之间呈剂量依赖性；三株单抗1B2F3A3、4F2C9A10、1E8F11B11分别与0.1μg/ml、0.5μg/ml、0.75和1μg/ml顺铂联合对B16和Colo细胞有协同抑制效应。