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研究目的:探讨新合成的苯并噁唑类化合物是否诱导肝癌细胞DNA损伤和凋亡,及其抑制肝癌细胞的分子机制。本实验研究利用肝癌细胞株SMMC-7721与HepG2细胞为主要研究对象,分别从细胞与动物不同水平探讨新苯并噁唑类化合物抑制肝癌的效果,并对该苯并噁唑化合物抑制肝癌细胞的作用机制进行探讨,为研究该抗肿瘤化合物提供理论基础。实验方法:用CCK-8法检测新苯并噁唑化合物对肿瘤细胞增殖抑制效果;Annexin V/PI流式细胞术检测该苯并噁唑化合物是否诱导肝癌细胞凋亡;用Hoechst33258染色法,TUNEL法和琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡形态学特点;建立Balb/c裸鼠肝癌肿瘤模型及进行在体抗肝癌实验研究;HE染色法检测该苯并噁唑化合物对小鼠肝癌组织形态学的影响;Western blotting方法检测肝癌细胞caspase-3,caspase-9,Bcl-2,Bax与PARP等相关凋亡蛋白的表达;实验结果:1.该苯并噁唑类化合物作用于肿瘤细胞后,细胞増殖的能力受到抑制,并且呈浓度依赖性;该苯并噁唑类化合物能使肝癌SMMC-7721和HepG2细胞发生调亡,并有浓度依赖性;2.DNA琼脂糖凝胶电泳结果表明该苯并噁唑化合物给药组肝癌细胞出现了一定程度的梯状DNA ladder,当化合物浓度增加,梯状条带更加明显;3.hoechst33258染色法结果发现该苯并噁唑化合物作用SMMC-7721细胞24h后,用荧光显微镜可看到凋亡细胞出现细胞核呈致密浓染,颜色比正常细胞发亮;4.TUNEL实验表明该苯并噁唑化合物能使肝癌SMMC-7721细胞发生凋亡,该化合物处理浓度越大,细胞凋亡率也越高。5.该苯并噁唑类化合物作用于肝癌SMMC-7721和HepG2细胞后,调亡调控途径的相关蛋白caspase-3与caspase-9被激活,其活化形式cleaved caspase-3与cleaved caspase9表达增加,呈浓度依赖性;同时该苯并噁唑类化合物使PARP分子发生剪切,使PARP剪切片段水平增加;且该苯并噁唑化合物降低肝癌SMMC-7721与HepG2细胞Bcl-2分子的表达,增加Bax表达,从而使细胞凋亡;6.在动物水平,该苯并噁唑化合物能够抑制肝癌移植瘤的生长,表现出一定程度的体内抗肝癌活性;结论:该苯并噁唑化合物通过引起细胞凋亡抑制肝癌细胞生长,其作用机理可能通过激活线粒体凋亡通路的caspase-9与caspase-3分子,使PARP被剪切,同时下调Bcl-2与上调Bax的表达从而诱导细胞凋亡。在动物水平,该苯并噁唑化合物能够抑制肝癌移植瘤的生长,有一定程度的体内抗肝肿瘤活性。