【摘 要】
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核磷蛋白(Nucleophosmin,NPM1)是一种多功能蛋白,可参与核糖体的生物合成,通过调节中心体的复制来维持基因组的稳定性,可在核质间穿梭,具有分子伴侣作用,并可通过多种信号通
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核磷蛋白(Nucleophosmin,NPM1)是一种多功能蛋白,可参与核糖体的生物合成,通过调节中心体的复制来维持基因组的稳定性,可在核质间穿梭,具有分子伴侣作用,并可通过多种信号通路调节细胞增殖和凋亡,参与多种肿瘤的发生。本实验利用原位杂交的方法检测了NPM1在小鼠性成熟卵巢、PMSG诱导的卵泡发育过程、hCG诱导的排卵以及黄体形成中的表达。在小鼠性成熟过程中,即从出生开始到出生后40天,NPM1mRNA在各个阶段的卵泡中均有表达。NPM1mRNA在原始卵泡和初级卵泡的颗粒细胞中表达,随着卵泡发育,在次级卵泡和有腔卵泡的颗粒细胞中的表达增强。在成熟卵泡中,NPM1mRNA在卵丘颗粒细胞中表达较强,壁颗粒细胞中表达减弱。在PMSG诱导的小鼠卵泡发育过程中,NPM1mRNA在颗粒细胞中的表达从PMSG处理后的第6小时开始增强,在第12小时出现峰值,此时颗粒细胞处于增殖时期。在第36小时和48小时,颗粒细胞增殖下降,NPM1mRNA在颗粒细胞中的表达明显减弱。此外,小鼠注射PMSG 48小时之后注射hCG,诱导成熟卵泡排卵。在hCG处理后4小时和8小时,NPM1mRNA分别在排卵前的GVBD和卵丘扩展时的卵丘颗粒细胞中有较强的表达。在hCG处理后16小时和18小时的排卵后的卵泡中,NPM1mRNA在壁颗粒细胞中表达较弱。注射PMSG 48小时后注射hCG,2至3天后,NPM1mRNA在黄体形成过程中的黄体中有较强的表达。我们于体外培养了小鼠原代颗粒细胞,用不同浓度的NPM1的特异性抑制剂NSC348884(0μM,0.5μM,1μM,2μM)处理24h后,利用RT-PCR技术检测了NPM1、P450scc、StAR基因的表达情况。结果显示P450scc基因的表达量随着NSC348884浓度的增加而下降,而StAR的表达没有显著的变化趋势,推测NPM1可能通过作用于P450scc促进类固醇激素的合成。这些结果表明,NPM1可能在小鼠卵泡发育的颗粒细胞增殖和黄体形成过程中起重要作用,并且可能促进类固醇激素合成。
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