【摘 要】
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目的:为检测TPL在诱导胰腺癌细胞凋亡中相关蛋白的表达差异,本实验采用双向凝胶电泳(two—dimensional electrophoresis,2-DE)和质谱(massspectrometry,MS)技术观察CK18在TPL诱导
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目的:为检测TPL在诱导胰腺癌细胞凋亡中相关蛋白的表达差异,本实验采用双向凝胶电泳(two—dimensional electrophoresis,2-DE)和质谱(massspectrometry,MS)技术观察CK18在TPL诱导胰腺癌细胞AsPC-1凋亡中的表达水平;探讨CK18在药物诱导胰腺癌细胞凋亡中表达是否有差异;研究CK18在TPL诱导胰腺癌细胞凋亡中的作用机制。方法:用含有10%胎牛的DMEM高糖培养液培养胰腺癌细胞株AsPC-1,AsPC-1/IKBM;MTT法测定TPL作用胰腺癌细胞IC50浓度,流式细胞仪测定各实验组细胞凋亡比例的差异。证明TPL可以诱导AsPC-1细胞凋亡,收集不同处理组细胞提取蛋白进行双向电泳,应用ImgemMster图像软件分析表达差异点,采用质谱分析法测定差异蛋白,应用PCR、Western Blot分别从基因和蛋白水平验证CK18表达差异。结果:角蛋白18在TPL诱导胰腺癌细胞AsPC-1凋亡中的表达水平与对照组比有明显差异(P<0.01),其差异度呈量效关系与时间依赖性。结论:TPL可以诱导胰腺癌细胞的凋亡,角蛋白18在TPL诱导胰腺癌细胞凋亡中呈上升趋势。其作用机制可能与Caspase-3和NF-KB有关。
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