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目的喉鳞状细胞癌(Laryngeal Squamous Cell Carcinoma,LSCC)是耳鼻咽喉领域常见的恶性肿瘤,是全身第二大常见的头颈癌,发病率呈上升趋势,且患者复发率高,生存率低。从基因水平上研究治疗LSCC的新方法已成为目前研究的热点。据报道,Micro RNA-101(miR-101)是包括喉鳞状细胞癌(LSCC)在内的多种恶性肿瘤中的肿瘤抑制因子。然而,miR-101在LSCC发展中的作用和分子机制尚未完全阐明。为进一步探讨出LSCC的新的治疗方案,提高临床生存率,本次研究把LSCC细胞系作为研究对象,通过多种实验方法进一步探究miR-101对LSCC的影响及作用机制,以期为该病的临床治疗提供理论指导。方法采用RT-qPCR法检测miR-101及zeste同源物2(EZH2)m RNA的表达。利用MTS法测定细胞增殖活性。通过流式细胞术法检测细胞凋亡指数,并通过测定半胱天蛋白酶-3(caspase-3)活性进一步评估细胞凋亡情况。采用Western Blot法测定EZH2蛋白表达。利用生物信息学软件,预测miR-101可能调控的靶基因,并通过双荧光素酶报告分析和RNA免疫沉淀(RIP)进一步验证miR-101与基因的靶向关系。结果在LSCC细胞系中miR-101表达水平显著下调。MTS检测结果显示miR-101过表达抑制Hep-2和TU-212细胞的增殖活性。流式细胞术及caspase-3活性检测结果显示miR-101过表达促进Hep-2和TU-212细胞凋亡。进一步的机制研究表明,miR-101可通过靶向结合EZH2抑制该基因表达。此外,EZH2上调削弱了miR-101介导的抗增殖和促凋亡作用。结论1、miR-101过表达抑制LSCC细胞增殖并促进凋亡;2、miR-101通过靶向EZH2抑制LSCC细胞增殖,并促进细胞凋亡,为深入了解LSCC的发病机制,并为开发针对性的靶向治疗药物奠定理论基础。