血液PEA检测鉴别PA感染与定植的实验研究

来源 :泸州医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tangweichao
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目的:通过建立PA(铜绿假单胞菌)感染与定植模型,应用FQ-PCR(实时荧光定量pcr)监测血液中PEA(铜绿假单胞菌外毒素)DNA在定植时相对表达量及探讨其在PA感染及定植的临床价值。方法:54只清洁级雄性SD大鼠由沪州医学院动物中心提供。所有大鼠均予以地塞米松磷酸钼3mg/kg,肌肉注射7天。随机分为感染模型组(简称模型组,18只,从气管注入2个麦氏单位的PA细菌液0.4m1)咽部定植组(简称定植组,18只,从咽部及鼻腔滴入与模型组相同浓度细菌液0.2m1)、生理盐水对照组(简称对照组,18只,从气管注入生理盐水0.4m1)。于接种后第3、7、11天分别处死大鼠6只,取定植组咽拭子涂片培养观察PA菌落,左侧肺组织匀浆并稀释后培养计数细菌,右肺下叶行HE染色切片并观察炎症程度。心脏采血,用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction, FQ-PCR)检测血液中PEA DNA对表达量,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbnent assay, ELISA)测定血清中ITNF-α、IFN-r、IL-6、IL-8浓度。结果:1、模型组血液PEA DNA表达在接种后第3、7、11天均明显高于定植组,两者比较存在显著性差异(P均<0.01):2、模型组血液PEA DNA表达水平在肺部炎症最重的第3天表达最高,在炎症较轻的第11天最低;3、模型组血清IL-6、IL-8、IFN-r、TNF-a曾高与定植组及对照组有显著性差异,且与血液PEA DNA呈同向变化。结论血液PEA DNA监测有助于对铜绿假单胞菌感染与定植的鉴别诊断,且.可预测肺部炎症的程度及预后。
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