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本文将采用以质粒为载体的RNAi技术,剔降鼻咽癌CNE-2Z细胞株hTERT基因,抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡。
本文利用阳离子脂质体转染试剂LipofectamineTM2000将siRNA质粒和荧光表达蛋白质粒共转染至CNE-2Z细胞中,通过观察荧光蛋白在细胞中是否出现表达分析质粒的转染效率。
研究成功构建了3种针对人端粒酶hTERT基因和一种混乱序列的siRNA真核表达质粒。LipofectamineTM2000在CNE-2Z细胞株中对siRNA质粒的瞬时转染效率较高,其转染效率具有剂量依赖性。构建的含siRNA表达框架质粒能特异且有效下调hTERT基因的表达,但不同pmU6-hTERT质粒特异性地下调hTERT基因表达的能力不同。