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酚氧化酶（Phenoloxidase,PO）（EC.1.14.18.1）又称酪氨酸酶（Tyrosinase）,是结构复杂的多亚基的含铜氧化还原酶。它广泛存在于动物、植物和微生物等生物体内,与人体的衰老、伤口愈合、果蔬的褐变等有密切关系。在昆虫体内,它是一种非常重要的酶类,在昆虫的变态发育和免疫系统中起着极其重要的作用。由于酚氧化酶具有重要的理论意义和发展前景,大量的研究工作集中在此领域。本文以菜青虫（Pieris rapae L.）酚氧化酶为试验对象,采用我们课题组自主设计、合成的水杨醛缩苯胺、2-羟基-3甲氧基苯甲醛缩苯胺、2-羟基-4-甲氧基苯甲醛缩苯胺等化合物为效应物,测定了其对菜青虫酚氧化酶抑制作用的影响;研究了上述化合物对菜青虫酚氧化酶的抑制动力学;根据测得的抑制活性结果,对2龄小菜蛾进行活体试验。具体研究结果如下:1、以水杨醛缩苯胺（salicylidene aniline）等9种化合物为效应物,研究其对菜青虫酚氧化酶的抑制作用。结果表明:所试9种化合物对菜青虫酚氧化酶均有一定的抑制作用,以水杨醛缩苯胺、水杨醛缩间氯苯胺、水杨醛缩对氯苯胺、水杨醛缩对溴苯胺、水杨醛缩对硝基苯胺抑制作用效果较好,它们对菜青虫酚氧化酶的抑制中浓度（IC50）分别为0.025 mmol·L-1、0.351 mmol·L-1、0.732 mmol·L-1、0.471 mmol·L-1和0.675 mmol·L-1。动力学研究表明,除化合物水杨醛缩对硝基苯胺对酚氧化酶的抑制作用表现为可逆混合性抑制类型外,其余三化合物均为典型的可逆竞争性抑制类型;5种化合物对菜青虫酚氧化酶的抑制常数（KI）分别为0.106 mmol·L-1、0.735 mmol·L-1、10.059 mmol·L-1、8.390 mmol·L-1和20.198 mmol·L-1。在含有PO或Cu2+的情况下,对水杨醛缩苯胺和水杨醛缩对硝基苯胺进行紫外光谱图分析,结果显示:水杨醛缩苯胺可以直接与PO结构中的铜结合,从而对PO产生作用;而水杨醛缩对硝基苯胺既不与外源铜离子发生反应,也不与PO结构中的铜发生作用。2、以2–羟基–4–甲氧基苯甲醛缩苯胺（ 2-hydroxy-4- methoxybenzylidene-aniline）等9种化合物为效应物,研究其对菜青虫酚氧化酶的抑制作用。结果表明:所试9种化合物对菜青虫酚氧化酶均有一定的抑制作用,以2-羟基-4-甲氧基苯甲醛缩苯胺、2–羟基–4–甲氧基苯甲醛缩间氯苯胺的效果较好,其对菜青虫酚氧化酶的抑制中浓度（IC50）分别为0.116 mmol/L、0.051 mmol/L;2–羟基–4–甲氧基苯甲醛缩苯胺为典型的可逆非竞争型抑制剂,抑制常数（KI）为1.96 mmol/L。该化合物直接对靶标酚氧化酶产生作用,而不是通过影响酶结构内的铜离子来产生作用的。3、以9种2-羟基-3-甲氧基苯甲醛缩苯胺（ 2-hydroxy-3- methoxybenzylidene-aniline）类化合物为效应物,研究了其对菜青虫酚氧化酶活力的影响,结果表明:所试9种化合物对菜青虫酚氧化酶均有一定的抑制活性,以2-羟基-3-甲氧基苯甲醛缩苯胺、2–羟基–3–甲氧基苯甲醛缩对硝基苯胺、2–羟基–3–甲氧基苯甲醛缩间氯苯胺和2-羟基-3-甲氧基苯甲醛缩3,4-二氯苯胺四种化合物抑制效果较好,其抑制中浓度（IC50）分别为0.013mmol·L-1、0.385 mmol·L-1、0.334 mmol·L-1和0.059 mmol·L-1。以2-羟基-3-甲氧基苯甲醛缩苯胺为代表进行动力学研究表明,该化合物对酚氧化酶的抑制作用表现为可逆竞争性抑制。4、采用部分离体测定效果表现较好的化合物对小菜蛾进行室内活体生测结果表明:供试三种化合物即2-羟基-4-甲氧基苯甲醛缩间氯苯胺、2-羟基-3-甲氧基苯甲醛缩苯胺、2-羟基-3-甲氧基苯甲醛缩3,4-二氯苯胺对小菜蛾直接“杀死”活性不高。