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近年来研究表明细胞周期失控是细胞增殖失控而导致癌变的重要原因。真核细胞周期是受细胞周期蛋白（cyclin）和细胞周期蛋白依赖激酶（cyclin dependent kinase,CDK）组成的蛋白复合体调控。CDI（cyclin dependent kinase inhibitor）是新发现的一类蛋白，通过与cyclin-CDK的结合从而抑制复合体的激酶活性，阻断G1期到S的转换，抑制细胞增殖，提示CDI是抑癌基因的产物。p21、p27均为广谱的CDI，使Rb蛋白不能发生磷酸化，从而使细胞周期停滞在G1期，故p21、p27的表达异常与肿瘤的发生、发展有关。cyclin D1基因是近年来发现的原癌基因，其编码的cyclin D1蛋白是细胞周期实现G1／S期转换所必需，与肿瘤的发生发展密切相关。细胞周期调节异常可伴随细胞死亡或凋亡机制的异常。CPP32处于caspases蛋白酶级联反应的核心地位，作用于多种底物，caspases参与机体多种生理与病理过程，为凋亡调控的一个新环节。因此，对CPP32的检测可能有助于探讨一些肿瘤的发病机制。 皮肤Paget病是一种少见的特殊的皮肤肿瘤，分为乳房Paget病和乳房外Paget病。它们的发病机制尚不明确，组织学来源还有争议。国内外已有人研究了部分皮肤肿瘤中p21、p27、cyclin D1、CPP32的表达和意义，但迄今为止皮肤Paget病中这些指标的表达研究尚未见报道。本文旨在研 浙江大学硕士学位论文 究pZI、p27、cyclin DI、CPP32在Paget病发生发展中的作用，并为临床 诊断和预后判断提供新的思路和手段。 材料与方法 52份皮肤Paget病组织标本均取自浙江大学医学院附属一院、二院 1986年～2001 年以来资料保存完整的石蜡组织块，其中NDD30例， EMPD22例。另取正常乳腺组织、正常皮肤组织各 12份以及正常人外阴皮 肤8份作对照。采用免疫组化SP法进行pZI． p27、cyclin DI、CPP32的 表达研究，一抗稀释浓度分别为1：25、l：50．：75、l：50，设立阳性。 阴性对照。结果判定：p21、p27、CyClin DI阳性定位于胞核，伴有胞浆着 色，CPP32阳性定位于胞浆。根据阳性细胞所占比例和染色程度，采用半 定量法分为四级。着色程度：细胞无着色，0分；淡黄色，1分；棕黄色， 2分；深褐色，3分。着色细胞数目：无细胞着色，0分：1＜着色细胞数 ＜ZS％，1分；着色细胞数在25％－SO％之间，2分；着色细胞数＞so％，3分。 根据以上－二项积分累计分为：阴性（一），为0分；弱阳性（＋），为l－2 分；阳性（＋＋），为3－4分；强阳性（＋＋＋），为5－6分。统计学处理采用 X 2检验，相关性分析采用 Kendall相关分析，生存分析采用 k－m生存分 析活，不同组别的生存差异采用I。og－rank分析。 结果与讨论 30例WD中P21阳性表达者16例，阳性率为53．3％，正常乳腺组织 PZI的阳性率gi．7％，两者比较具有显著性差异（P＜0．05）。22例EMPD中 PZI 阳性率为63．0％，显著低于正常皮肤上皮和正常外阴汗腺的表达 （P＜0．05）。P21的表达与年龄有关，在WID中，)50岁以上组PZI的阳性 率显著高于年龄t50岁组。PZI的表达与分化程度、有无淋巴结转移以及 预后均无关。 2 浙江大学硕士学位论文 Kl，D和 E哑D中 p27的阳性表达率均为 40刀％，低于正常乳腺组织和 正常皮肤组织。其中MPD与正常乳腺组织、EMPD与正常外阴汗腺的阳 性表达率比较有显著统计学差异（P＜0刀5）。p27的表达与年龄、分化程度、 有无淋巴结转移、预后均无关。 Cyclin DI在正常乳腺组织和正常皮肤组织中几乎不着色，而在 Al，D 和ENfl，D中的阳性表达率分别为733％、72．7％，与正常组织比较有非常显 著的统计学差异（P＜0．of）。cyclin DI的表达与分化程度、有无淋巴结转 移、预后均无关。 CPP32在MPD和 EppD中的阳性表达率分别为 40．0％、55．0％，均低于正 常乳腺组织和正常外阴汗腺的表达，说明CPP32表达降低与皮肤Pa驴t病 的发病有关。在EMPD中年龄360岁组CPP32表达阳性率高于年龄t60岁 组。而与其它的临床病理参数分化程度、有无淋巴结转移、预后无关。 PZI影响凋亡可以通过细胞周期延搁使得细胞凋亡加速，也可直接抑 制D巳激活死亡通路。在MPD中PZI与CPP32呈正相关。不论pD或EMPD， P27和 CPP32、cycl in DI和 CPP32的表达均无相关性。 结 论 l 在MPD及EWD中，pZI、p27、CPP32的表达显著低 于正常乳腺组织