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黑木相思（Acacia melanoxylon），是近年来我国南方引进的主要用材树种之一，它具有适应性强、速生丰产、耐寒冷、用途广泛等特点。本试验以4个不同种源黑木相思种子为基本材料，从无菌体系的建立、继代培养、生根诱导、炼苗移栽等各个环节展开研究；以种子无菌萌发下胚轴为诱导愈伤组织的起始材料，建立起4个不同种源黑木相思愈伤组织体系，并从愈伤组织分化出苗；以长期继代黑木相思愈伤组织为基本材料，建立了黑木相思细胞悬浮培养细胞系。主要研究结果如下： 1．黑木相思无菌体系的建立。比较几种不同的黑木相思种子前处理方法，采用1.84g／mL浓硫酸处理10min，种子发芽率达到86.7％；然后采用常规消毒0.1％升汞处理15min，可以使污染率控制在6％；接种到MS+1g／L活性炭培养基中，生长状况良好。 2．黑木相思芽苗增殖培养。采用正交试验设计，考虑不同植物生长素对黑木相思芽苗增殖的影响，筛选出一代培养基为附加1.0mg／L 6-BA、1.0mg／L KT和0.4mg／L IBA的MS培养基，30d后增殖数可以达到3.15；二次继代时采用MS+0.4mg／L KT+0.4mg／L IBA+20g／L蔗糖；壮苗培养基选择MS+0.2mg／L IBA+15g／L蔗糖。 3．黑木相思试管苗生根和移栽。采用正交试验设计，考虑不同种类和浓度生长素对黑木相思无菌苗生根的影响，筛选出生根培养基的配方为1／2MS+0.4mg／L IBA+0.2mg／L IAA+15g／L蔗糖；移栽基质选择黄心土∶泥炭土=2∶1，移栽后一个星期内是移栽成活的关键时期，注意保持叶片水分平衡，移栽成活率可以达到80％以上。 4．黑木相思愈伤组织体系的建立。以4个种源黑木相思种子无菌萌发下胚轴为诱导愈伤组织基本材料，筛选出诱导愈伤组织的培养基为1.0mg／L 2，4-D 2.0mg／L BA的MS培养基，诱导率为95％；愈伤组织继代培养基选择0.5mg／g 2，4-D、2.0mg／L BA、300mg／L LH的MS培养基与2.0mg／L BA、1.0mg／L KT、1.0mg／L NAA、300mg／L LH的B5培养基交替培养。 5．黑木相思愈伤组织培养再生植株。以长期继代黑木相思愈伤组织为基本材料，在光照条件下，在含有1.0mg／L BA、1.0mg／L KT、0.5mg／L NAA和300mg／L LH的MS培养基中，可以使愈伤组织的分化率达到30％；分化愈伤组织在1.0mg／L BA、0.5mg／L NAA和0.1mg／L GA的培养基上，再生率44％。 6．黑木相思悬浮细胞系的建立。考虑培养起始接种量、继代周期、蔗糖含量、AgNO3等培养条件等对悬浮细胞的生长有重要影响。以MS为基本培养基，附加0.5mg／L 2，4-D、2.0mg／L BA的10mL液体培养基中加入0.2mL密实体积的愈伤组织，30d可以建立稳定的细胞悬浮系，7d继代一次。