[目 的]乳腺癌是全世界女性最常见的恶性肿瘤之一,复发和转移是乳腺癌患者死亡的主要原因。肿瘤相关成纤维细胞（Cancer-associated fibroblasts,CAFs）是肿瘤微环境中的核心成分,在恶性肿瘤的发生发展中起着重要的作用。课题组前期结果显示HMOX1在CAF和正常组织成纤维细胞（Normal fibroblasts,NF）中的表达有显著差异。有氧糖酵解增强是肿瘤细胞快速生长和增殖的一种代谢适应,是恶性肿瘤的标志之一。本课题旨在研究①CAF细胞HMOX1表达对乳腺癌细胞增殖、克隆、迁移等恶性生物学行为的影响。②CAF细胞HMOX1表达对乳腺癌细胞糖酵解能力和线粒体功能的影响。③初步探索CAF细胞HMOX1表达影响乳腺癌细胞代谢的机制。[方法]1.实时荧光定量 PCR（Quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR）检测HMOX1在CAF和NF中的表达,选取HMOX1 mRNA差异表达明显的CAF细胞用于后续实验。2.收集HMOX1 shRNA和NC组成纤维细胞条件培养基分别培养乳腺癌细胞12小时。根据 Agilent seahorse XFP cell Mito stress test kit和 Agilent seahorse XFP glycolic rate assay kit试剂盒说明书上机测值,观察HMOX1敲减CAF细胞对乳腺癌细胞线粒体功能和糖酵解能力的影响。3.收集HMOX1 shRNA、NC组成纤维细胞的条件培养基分别培养乳腺癌细胞12h,用Western blot测定不同条件下乳腺癌细胞内糖酵解关键酶乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase A,LDHA）、己糖激酶 2（Hexokinase 2,HK2）、丙酮酸激酶M2亚型（pyruvate kinase M2 isoform,PKM2）的蛋白表达差异。4.应用SPSS20.0软件包的分析和统计,各组间实验数据若为正态分布均以均数±标准差（x±s）表示,非正态分布用中位数及四分位数表示,数据之间的差异根据数据特征选择用t检验等检验法进行检验。[结 果]1.HWOX1 shRNA 显著降低 CAF中HMOX1 mRNA（P=0.028）和蛋白（P=0.000）的表达。2.与NC组相比,HMOX1敲减CAF条件培养基促进乳腺癌细胞增殖（P<0.05）、克隆（P<0.05）、迁移能力（P<0.05）。3.代谢实验检测结果显示,HMOX1敲减CAF条件培养基促进乳腺癌细胞的代偿糖酵解速率和基础质子流速率（均P<O.05）,差异有统计学意义;HMOX1敲减CAF条件培养基抑制乳腺癌细胞储备呼吸值和最大呼吸值（均P<0.05）,差异有统计学意义。4.Western blot实验结果显示,与NC组相比,HMOX1敲减CAF条件培养基培养的乳腺癌细胞LDHA、PKM2、HK2糖酵解关键酶的蛋白表达更高（均P<0.05）,差异有统计学意义。[结 论]1.HMOX1敲减CAF细胞可能通过促进乳腺癌细胞糖酵解能力,同时抑制线粒体功能进而影响乳腺癌细胞增殖、克隆、迁移能力。2.HMOX1敲减CAF细胞可能通过促进糖酵解关键酶LDHA、PKM2、HK2的表达促进乳腺癌细胞糖酵解能力。