牡丹籽蛋白酶解产物免疫调节作用研究

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牡丹属于芍药科多年生木本植物,具有一定的食用和药用价值。牡丹籽作为生产牡丹皮的副产物,除了富含亚油酸等多种不饱和脂肪酸外还含有大量的蛋白,牡丹籽脱脂后,籽粕中蛋白含量可达20~30%。牡丹籽榨油后的牡丹籽粕常被用于饲料或畜禽养殖,对其深加工和利用较少。因此,研究牡丹籽粕中蛋白的进一步应用具有一定的现实意义。本研究以牡丹籽蛋白为主要对象,研究了其酶解产物的免疫调节作用。采用碱提酸沉法提取牡丹籽蛋白并优化提取条件。以小鼠为实验动物,以不同剂量的牡丹籽蛋白酶解进行灌胃,通过对小鼠多项免疫指标的测定,评价牡丹籽蛋白酶解产物对小鼠的免疫调节作用。同时,将牡丹籽蛋白酶解产物作为佐剂与禽多杀性巴氏杆菌ptfA基因的DNA疫苗混合后免疫鸡,检测其诱导的体液和细胞免疫应答水平及攻毒保护效果,确定牡丹籽蛋白酶解产物对禽多杀性巴氏杆菌ptfA基因DNA疫苗免疫效果的影响。实验结果表明,牡丹籽蛋白的提取最佳工艺组合为浸提时间100 min,浸提温度55℃,p H 11,料液比1:20(m:V),在该工艺组合条件下,蛋白质提取率达到85.89%;按不同剂量灌胃后,灌胃组小鼠各项免疫指标均高于对照组,其中中、高剂量组小鼠的免疫器官指数、DTH反应、腹腔巨噬细胞吞噬能力、血清溶血素水平、脾淋巴细胞增殖水平和IFN~γ、IL-2和IL-4分泌水平显著或极显著高于对照组。以牡丹籽蛋白酶解产物为佐剂时,其对禽多杀性巴氏杆菌ptfA基因DNA疫苗诱导的血清抗体水平无明显影响,但可提高免疫鸡的外周血淋巴细胞增殖水平以及IL-2和IL-4的分泌水平,且为实验动物提供的保护率高于不含佐剂的ptfA基因DNA疫苗。表明牡丹籽蛋白酶解产物对小鼠具有较好的免疫调节作用,且以其为佐剂可在一定程度上增强ptfA基因DNA疫苗的免疫效果。
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