人类基因组计划的完成为研究者提供了大量序列信息,极大的改变了我们与疾病发展相关知识的基础,使人们越来越关注基因在疾病发生发展过程中扮演的角色。因此,各种研究基因的新技术不断涌现,如RNA干扰技术、反义技术、基因组编辑技术等,都是在基因表达水平调控的研究,但是各有不足之处。基因表达产物一般为蛋白质,部分为RNA。基因表达经过如转录、去除内含子的RNA剪接、翻译蛋白质以及翻译后修饰等步骤,其中转录起始是基因表达的关键一步,可作为调控基因表达的重要途径之一。本篇论文试图基于转录因子结合位点的干扰建立一种新颖的操纵基因表达的方法。作为测试实验,首先根据基因对应的mRNA序列设计引物,通过荧光定量PCR技术确定了实验室现有的细胞系中疾病相关基因的表达信息。使用PCR技术和琼脂糖凝胶电泳技术对基因的表达加以验证。实验设计了具有靶基因转录因子结合位点相同序列的竞争性寡聚核苷酸探针,该竞争性寡聚核苷酸探针用于干扰基因的表达。并设计了两组探针加以对照,其中一组探针含有突变位点,另一组探针设计为人类基因组上不存在的不相关序列。三组寡聚核苷酸探针均用Cy3荧光染料标记然后各自导入细胞。观察探针进入细胞后,提取细胞的总RNA并合成cDNA第一条链作为荧光定量PCR扩增模板,并通过荧光定量PCR技术来验证三种探针处理后的基因表达差异。研究结果表明,经荧光定量PCR检测发现实验组与对照组相比,实验组细胞的靶基因表达量显著降低,表达量为对照组的66.89%。虽然我们的实验结果尚在初步验证阶段,但是能够清楚地表明通过转录因子结合位点竞争性干扰来操纵基因表达水平的可行性。对该方法进行进一步发展,能够提供一个具有广阔研究前景和诊断应用的强有力的工具。