【摘 要】
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一般地大多数卵巢癌患者就诊时已为中晚期,而卵巢癌的临床死亡率位居妇科恶性肿瘤首位。这主要是由于卵巢癌治疗过程中,缺乏明确的预后评价,为治疗带来困难。因此,迫切需要更为准确的预后评价方法,为患者预后及治疗提供参考方案,减轻患者的治疗及心理负担。针对这一问题,本文从细胞力学特性的角度切入,探究细胞受化疗药物多西他赛（Docetaxel,DOC）抑制作用后,细胞的生物物理特性变化规律;分离患者循环肿瘤细
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一般地大多数卵巢癌患者就诊时已为中晚期,而卵巢癌的临床死亡率位居妇科恶性肿瘤首位。这主要是由于卵巢癌治疗过程中,缺乏明确的预后评价,为治疗带来困难。因此,迫切需要更为准确的预后评价方法,为患者预后及治疗提供参考方案,减轻患者的治疗及心理负担。针对这一问题,本文从细胞力学特性的角度切入,探究细胞受化疗药物多西他赛（Docetaxel,DOC）抑制作用后,细胞的生物物理特性变化规律;分离患者循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cells,CTCs）,探究患者接受化疗后,CTCs的力学特性;通过SPSS25统计分析随访的卵巢癌患者总生存时间以及建立细胞力学特性分析ROC曲线（Receiver Operating Characteristic Curve）,评价患者的预后风险。主要研究内容如下:首先,本文探究了SKOV-3细胞在低浓度DOC药物作用下,细胞的抑制生长规律及其超微结构和力学特性变化特点。结果表明DOC可以促使细胞萎缩、延伸面积缩小、细胞伪足数量降低,表面粗糙度增加,细胞粘附力降低了37.04%,杨氏模量增加了1.57倍。DOC能够有效改变细胞的力学性能,抑制细胞的侵袭迁移能力。其次,利用实验室自主开发的循环肿瘤细胞分离仪,分离患者CTCs,并进行肿瘤细胞标志物检测验证分离效果。结果表明成功从卵巢癌患者血液中分离得到CTCs,并建立CTCs的原子力显微镜（AFM）检测预处理方法。最后,通过患者随访选取72例卵巢癌患者作为研究对象。其中死亡27例,1年、3年及5年生存率分别为82.2%、57.0%及35.9%,平均生存周期41个月。分析了九项临床指标,其中FIGO分期、腹水、单/双侧、化疗方案为影响卵巢癌预后的独立危险因素。选取31例患者CTCs细胞化疗前细胞高度平均为4.12±0.83μm,化疗后为4.87±0.71μm,平均提高18.203%。粘附力平均降低了0.25 n N。化疗前杨氏模量为3.884±0.045 k Pa,化疗后为4.214±0.025 k Pa,增加了0.33 k Pa。与SKOV-3细胞相比,游离的CTCs细胞受到DOC的抑制作用,细胞超微结构和力学特征发生改变。细胞粘附力的降低,抑制了CTCs的锚定及细胞粘附作用,细胞刚性增加,抗形变能力增强,可迁移性下降。对患者进行卵巢癌ROC分析,CTCs细胞杨氏模量为2.85 k Pa时,为最佳Cut-Off值,曲线下面积（Area Under the Curve,AUC）为0.767。在同等评价的其他临床指标中,杨氏模量具有较高的评价准确性。本文基于原子力显微检测技术,创新性的应用卵巢癌外周血CTCs的力学特性,建立患者CTCs生物力学表征方法,该方法能够初步评价卵巢癌患者预后康复情况,为患者进步一辅助治疗提供实验参考。
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