慢性乙型病毒性肝炎患者血清IL-27水平及其临床意义

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目的:检测HBV感染患者不同病程阶段(包括慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化(LC)及慢加急性肝衰竭(ACLF))血清IL-27变化,分析其血清IL-27变化与IFN-γ、肝功能检测指标及HBV免疫学指标等之间的关系,从而探讨IL-27在CHB病情进展中的作用,为IL-27应用于临床CHB病情监测及指导用药提供科学依据。方法:1研究对象:CHB患者89例,其中轻度组(light chronic hepatitis B,CHB-l)31例,中度组(moderate chronic hepatitis B,CHB-m)51例,重度组(severe chronic hepatitis B,CHB-s)7例;HBV感染相关肝硬化(liver cirrhosis,LC)患者41例(代偿期(compensatory liver cirrhosis,LC-c)患者12例,失代偿期(decompensatory liver cirrhosis,LC-d)患者29例);HBV感染相关慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure,ACLF)患者36例;健康体检者10例作为对照组。2生化专用试管取清晨空腹静脉5ml,离心、收集血清后置于-80℃,其余血样送检验科进行肝功能及免疫学检查,主要检测ALT、TBIL、ALB等肝功能指标及HBV相关病毒指标。同时采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法,严格按试剂盒说明书要应用Real-time PCR检测血清中HBV-DNA水平。同时凝血功能专用试管另取5ml外周血进行凝血酶原活动度(prothrombin time activity,PTA)检测,以上均由专职检验人员操作。3采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测,参照人IL-27、IFN-γ检测试剂盒说明书,每孔加入50?l标准品或待测样品,在450nm波长处测定各孔的光密度值(OD值),并根据标准孔数值绘制标准曲线,计算待检样品中IL-27、IFN-γ的含量。4常规病理检测患者肝脏纤维化及炎症反应程度:本组中有57例CHB患者进行肝脏穿刺组织病理活检,方法按照临床常规流程进行。5对血清IL-27含量与IFN-γ含量及各类患者外周血血清中肝功能检测指标的相关性进行分析。同时分析不同血清ALT含量、不同HBV-DNA复制程度、不同肝脏炎症及纤维化程度患者外周血清中IL-27含量差异及其意义。结果:1各组患者外周血血清中肝功能指标、IL-27、IFN-γ水平比较不同程度CHB、LC及ACLF患者血清中ALT、AST、TBIL、IL-27、IFN-γ的水平均显著高于对照组(P<0.01),PTA则明显低于对照组(P<0.05)。2各组患者血清IL-27含量与血清中IFN-γ含量及肝功能各指标相关性分析CHB、LC及ACLF患者血清中IL-27含量分别与IFN-γ、肝功能指标(ALT、TBIL、ALB)及PTA的表达水平呈明显相关性(P<0.05),且IL-27含量与ALT、TBIL及IFN-γ含量明显呈正相关(P<0.05),而与PTA及ALB含量则明显呈负相关(P<0.05)。3血清IL-27与肝组织炎症分级的关系57例行肝穿刺活检术慢乙肝患者,血清IL-27较健康对照组患者明显增高(P<0.05),IL-27值并未随着肝脏炎症等级升高而升高,各组之间差别无统计学意义(P>0.05)。4血清IL-27与肝组织纤维化的关系行肝穿刺活检术患者中有56例肝脏出现不同程度的纤维化,患者血清IL-27均较健康对照组患者明显增高(P<0.05),但各组血清IL-27水平与肝脏纤维化分级无关(P>0.05)。5血清IL-27与ACLF患者预后的关系本组36例ACLF患者中,存活11例,死亡25例。存活组患者血清IL-27均值低于死亡组,但差异无统计学意义(P>0.05)。6血清IL-27与MELD评分的关系将LC-c、LC-d及ACLF患者进行MELD评分,分析血清IL-27与MELD评分的关系。结果显示,MELD>40组与MELD≤40组比较,IL-27含量明显增高,组间差别有统计学意义(P<0.05)。7血清IL-27与HBe Ag的关系本组患者中,HBe Ag(+)90例,HBe Ag(-)86例。统计学分析结果显示,HBe Ag阳性组与阴性组比较,血清IL-27水平差别无统计学意义(P>0.05)。8血清IL-27与HBV复制的关系根据HBV载量不同分为HBV-DNA<5log10 copies/ml 60例,5≤HBV-DNA≤7log10copies/ml 69例,HBV-DNA>7log 10copies/ml 47例。方差分析结果显示,三组之间两两比较血清IL-27水平差别无统计学意义(P>0.05)。结论:1 IL-27可促进Th1型细胞免疫应答,增加IFN-γ的表达,同时可能是HBV感染患者肝细胞受损的重要机制之一,在一定程度上反映肝细胞损伤的严重程度,但是IL-27本身可能对HBV复制无明显作用。2 IL-27可能与慢性乙肝重症化相关,是预测其预后的参考指标之一。
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