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第一部分苏州地区人博卡病毒的流行病学特点及气候相关性分析目的 了解苏州地区人博卡病毒（Human Bocavirus,HBoV）的流行特征及与气候的相关性。方法 选取苏州大学附属儿童医院2012年1月～2019年12月8年间因急性下呼吸道感染（acute lower respiratorytract Infection,ALRI）住院的 1 6742例患儿,年龄在 1月至18周岁之间,入院24小时内进行鼻咽分泌物的肺炎支原体（myocoplasima pneumonia,MP）,HBoV,呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）,腺病毒（adenovirus,ADV）,流感病毒A、B型（influenza viruses A and B,IV-A、IV-B）,副流感病毒 1、2、3型（parainfluenza virus 1～3,Pinf 1～3）,人类偏肺病毒（human metapneumovirus,HMPV）,鼻病毒（human rhinovirus,HRV）及细菌学培养等病原学检测。分析各病毒及MP在检出情况、流行季节、易感年龄等方面的流行病学特点以及HBoV与气候的相关性。结果 1.2012至2019年共纳入ALRI住院患儿16742例。其中病毒共检出4965例,病毒总检出率为29.66%,MP共检出5322例,MP检出率为31.79%,细菌共检出4187例,细菌总检出率为25.01%。病毒病原检出率前三位依次为RSV（10.46%）、HRV（10.16%）和HBoV（5.11%）,其后依次为Pinf-3（3.61%）、HMPV（1.39%）、ADV（0.92%）、IV-A（0.88%）、IV-B（0.36%）、Pinf-1（0.32%）,Pinf-2（0.14%）。2.HBoV共检出856例,其中男性533例,女性323例,男女比例1.65:1。单纯HBoV感染282例,占32.9%,混合感染共574例,占67.1%。3.2012年至2019年HBoV检出率浮动在3.66%～7.24%之间,其中2013年、2014年、2017年、2018年及2019年均超过5.0%。检出率最低的为2016年,仅为3.66%,最高为2013年,检出率高达7.24%,各年度之间检出率差异有统计学意义（P＜0.001）。每年7～8月均为HBoV的流行季,检出率均在5%以上,2019年8月检出率最高,达17.82%。HBoV夏季检出率最高,为7.06%,其次为秋季,占6.75%,显著高于冬季的3.75%及春季的2.86%,差异有统计学意义（P均＜0.008）。4.HBoV在～1岁及～3岁组检出率高,分别为9.63%及8.79%,显著高于＜6月龄组、～6岁组及≥6岁组（P均＜0.005）,～6岁组检出率为3.59%,显著高于＜6月龄组的1.89%和≥6岁组的1.25%（P均＜0.005）,＜6月龄组和≥6岁组HBoV检出率间差异无统计学意义（P＞0.005）。5.HBoV检出率与月平均气温之间为中度相关（r=0.421,P＜0.001）,与月平均雨量为低度相关（r=0.379,P＜0.001）,与月平均湿度（r=-0.077,P=0.454）、月平均日照（r=0.034,P=0.746）、月平均风速（r=-0.100,P=0.333）不相关。将单因素分析有统计学意义的月平均气温及月平均雨量作为自变量与因变量月HBoV检出率行多元回归分析,月平均气温及月平均雨量均入选方程（β=0.129,t=2.824,P=0.006;β=0.015,t=1.988,P=0.050）,提示月平均气温及月平均雨量为HBoV高检出率的独立危险因素。结论 苏州地区儿童下呼吸道感染中HBoV居病毒病原的第三位,夏秋季节为HBoV感染的流行季,好发年龄为6月～3岁,月平均温度和月总降雨量均与HBoV的检出率成正相关。第二部分苏州地区人博卡病毒呼吸道感染的临床特点目的 了解苏州地区HBoV感染的临床特性,以期为指导HBoV感染住院患儿治疗提供帮助。方法 选取2012年1月1日至2019年12月31日8年间因ALRI入住苏州大学附属儿童医院并且呼吸道病原学明确为HBoV感染的患儿作为研究对象,收集性别、年龄、临床表现、实验室检查等资料。分析单纯HBoV感染在各年龄段、不同病毒载量以及各种混合感染时临床表现的差异,并将单纯HBoV感染病例与单纯的RSV、HRV感染病例进行临床特点的比较。结果 1.单纯HBoV感染最常见的临床表现为咳嗽,占95.74%（270/282）,其次为发热,占 52.13%（147/282）。47.87%（135/282）的患儿出现喘息,36.82%（101/282）的患儿出现鼻塞流涕症状。出现呼吸困难的患儿占10.28%（29/282）,出现气促及紫绀的患儿分别占 19.86%（56/282）及 3.55%（10/282）。2.不同年龄HBoV感染特点:在～1岁组患儿喘息发生率为65.28%,～3岁组为47.55%,＜6月龄组为37.5%,≥6岁组及～6岁组仅为33.33%和24.32%,组间差异有统计学意义（χ2=18.511,P=0.001）。发热发生率与年龄呈正相关,＜6月龄组发热患儿占16.67%,～1岁组为48.61%,显著少于～3岁的71.33%、～6岁的75.68%以及≥6岁的83.33%,差异均有统计学意义（χ2=35.674,P＜0.001）。单纯HBoV感染的ALRI患儿肺部湿罗音/痰鸣音、喘鸣音与年龄呈负相关,＜6月龄组、～1岁组、～3岁组、～6岁组、≥6岁组,湿罗音/痰鸣音及喘鸣音发生率分别为83.33%与37.5%、83.33%与 62.50%、81.12%与 54.55%、56.76%与 27.03%以及 0.00%与 0.00%,组间差异均有统计学意义（P＜0.001）。小年龄组患儿更易出现血小板升高,＜6月龄组及～1岁组患儿血小板中位数分别为431.50X 109/ml、391.50× 109/ml显著高于～3岁组及～6岁组的315.00×109/ml及277×109/ml,差异有统计学意义（P＜0.005）。小年龄组更易出现肝功能异常,＜6月龄组患儿出现谷丙转氨酶升高比例为23.81%,显著高于～6岁组的2.70%（P＜0.005）。3.不同病毒载量HBoV感染特点:高载量单纯HBoV感染组的患儿咳嗽占98.74%、喘息占55.35%、气促占25.79%,显著高于低载量组的85.71%、28.57%及7.14%,组间差异均有统计学意义（P＜0.05）。高载量单纯HBoV感染组的患儿肺部喘鸣音占56.60%,显著高于低载量组的28.57%,差异有统计学意义（P＜0.001）。4.HBoV单纯感染及混合感染特点:单纯感染出现发热的比例为52.13%,显著低于混合MP组的72.62%,而单纯HBoV组出现呼吸困难（10.28%）和气促（19.86%）的比例,显著高于混合MP组的2.38%及8.93%（P均＜0.005）。单纯HBoV感染患儿出现喘鸣音的比例为50.35%,显著高于混合MP组的35.12%（P＜0.005）。单纯HBoV患儿CRP升高比例为29.08%,显著低于混合细菌感染组的44.44%（P＜0.005）。5.单纯HBoV与RSV、HRV感染特点比较:HBoV感染组患儿出现咳嗽（95.74%）、喘息（47.87%）、鼻塞流涕（35.82%）的比例均显著低于RSV组患儿（P均＜0.017）。而出现发热的比例（52.13%）显著高于RSV（25.61%）及HRV组（31.85%）,差异有统计学意义（P均＜0.017）。HBoV组患儿肺部闻及湿罗音/痰鸣音及喘鸣音的比例（76.95%,50.35%）均显著低于 RSV 组（87.95%,58.83%）。结论:HBoV感染的小婴儿以喘息多见,年长儿则以发热多见;HBoV病毒载量高低跟病情轻重呈正相关;与RSV及HRV相比较,HBoV感染发热更常见,全身炎症反应更明显;HBoV混合感染与单纯HBoV临床表现无明显差异。第三部分人博卡病毒感染的重症预测指标目的 探讨HBoV感染后的炎性因子及免疫机制改变,尤其是重症HBoV感染患儿体内免疫反应情况,以期能早期识别重症患儿,为HBoV感染住院患儿的治疗提供帮助。方法 选取了50例2020年9月20日至2021年8月31日因社区获得性肺炎入住苏州大学附属儿童医院并且呼吸道病原学明确为HBoV感染的患儿,以同期10例外科腹股沟斜疝的术前患儿作为对照组,入院6h内收集外周血,采用PCR法检测HBoV-DNA,流式细胞检测树突状细胞（dendritic cells,DC）细胞亚群,采用ELISA法检测细胞因子水平,分析HBoV感染时DC细胞数量及细胞因子的变化。有统计学差异的细胞因子绘制ROC曲线,以灵敏度及特异度最高点作为界值。结果 1.50例HBoV感染患儿外周血血清HBoV-DNA检出阳性28例,阳性率为56.00%,重症组患儿阳性率为85.00%,普通组患儿阳性率为36.67%。重症患儿HBoV-DNA检出阳性率显著高于普通组患儿（χ2=11.377,P=0.001）。HBoV-DNA阳性患儿平均住院时间为9.79±4.86天,高于HBoV-DNA阴性组（t=1.732,P=0.090）,但差异在0.050水平上无统计学意义。HBoV-DNA阳性患儿入住重症监护病房（intensive care unit,ICU）、需要氧疗及需要气管插管比例分别为53.6%、60.7%、21.4%,均显著高于HBoV-DNA阴性组（P均＜0.050）。2.HBoV普通组患儿CD1c+DC和pDC绝对计数低于健康对照组,但两组差异无统计学意义（Z=-1.937,P=0.053;Z=-1.718,P=0.086）。HBoV普通组患儿CD1C+DC占DC比例较健康对照组有显著下降（Z=-2.702,P=0.007）,其pDC占DC比例较健康对照组下降,但差异无统计学意义（Z=-2.343,P=0.019）。HBoV感染重症组患儿无论在CD1c+DC和pDC的绝对值还是其占DC及白细胞总数比例均较健康对照组及HBoV普通感染组明显下降。3.HBoV重症组白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、单核细胞趋化蛋白-1（The monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1）的中位水平为44.08pg/ml、30.51pg/ml、218.96pg/ml,显著高于HBoV普通组的 13.31pg/ml、10.64pg/ml、89.17pg/ml,差异有统计学意义（P＜0.017）。HBoV重症组干扰素-γ（interferon,IFN-γ）、白细胞介素-33（interleukin-33,IL-33）的中位水平为4.27pg/ml、10.24pg/ml,显著低于HBoV普通组的 12.27pg/ml、18.46pg/ml,差异有统计学意义（P＜0.017）。4.IL-1β、TNF-α可作为重症感染的预测指标,IL-1β、TNF-α的曲线下面积（Area Under The Curve,AUC）分别为0.848、0.854。IL-1β在27.66 pg/ml水平预测最佳,其敏感性为80.0%,特异性为83.3%。TNF-α在14.68 pg/ml水平预测最佳,其敏感性为85.0%,特异性为76.7%。结论 1.部分患儿HBoV感染后会出现病毒血症,重症患儿出现病毒血症概率更高。而出现病毒血症的患儿临床表现更重,病情恢复慢。2.HBoV感染后患儿外周血CD1c+DC及pDC有所下降,尤其在重症感染的患儿中下降更为明显,造成IFN-γ表达降低;血清TNF-α、IL-1β异常升高对重症感染有一定的预测作用。