IP6-PAMAM-NH2介导的胶原纤维外脱矿体系在牙本质粘接中的应用

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目的:为了解决传统酸蚀粘接技术导致的树脂-牙本质粘接界面结构的破坏引起的树脂-牙本质粘接耐久性不足的问题,本课题拟在溶解性良好的树枝状大分子PAMAM-NH2表面引入小分子强效螯合剂植酸(IP6),构建大分子量(>40k Da)IP6-PAMAM-NH2体系,检测其螯合牙本质钙离子的能力,研究IP6-PAMAM-NH2复合体作为牙本质粘接前处理剂实现选择性纤维外脱矿和抗菌的能力,评估其对牙本质粘接耐久性的影响,为制备新型牙本质粘接体系提供新思路和新技术。方法:1)合成IP6-PAMAM-NH2聚合物,利用红外光谱、凝胶渗透色谱、核磁共振以及高效液相色谱法对合成物质进行检测和表征;2)检测IP6-PAMAM-NH2复合体作为牙本质粘接前处理剂实现选择性纤维外脱矿的能力。制取不同浓度的IP6-PAMAM-NH2溶液,处理新鲜牙本质表面,依次进行“冲洗湿粘接”及“冲洗干粘接”,通过微拉伸试验检测其在两种技术状态下复合树脂-牙本质的粘接强度,采用扫描电镜(SEM)观察经IP6-PAMAM-NH2处理的牙本质胶原基质的微观形貌;原子力显微镜(AFM)观察牙本质表面粗糙度,采用原位酶谱法评价IP6-PAMAM-NH2对脱矿牙本质层内基质金属蛋白酶(MMPs)活性的抑制状况;采用活死细菌荧光染色法评价其对牙本质表面S.mutans和E.faecalis生物膜的抗菌性能,采用CCK-8细胞活性法评价其对牙髓细胞的生物安全性。结果:红外光谱和凝胶色谱结果显示IP6-PAMAM-NH2合成成功,聚合物分子量满足选择性纤维外脱矿所需的大小(>40 k Da);微拉伸试验结果显示经IP6-PAMAM-NH2溶液处理的实验组复合树脂-牙本质“冲洗湿粘接”和“冲洗干粘接”的即刻粘接强度与磷酸“干粘接”组及植酸“干粘接”组对照无明显差异;SEM、AFM结果表明经IP6-PAMAM-NH2溶液处理的牙本质脱矿层中的胶原纤维呈现蓬松不塌陷的状态,实验组粗糙度大于磷酸组,进一步证实了选择性纤维外脱矿理论的可实践性;原位酶谱研究表明经IP6-PAMAM-NH2溶液处理的牙本质脱矿层里未见明显的MMPs活性;抗菌实验显示IP6-PAMAM-NH2具有较强的抑制S.mutans和E.faecalis的生物膜活性的能力;CCK-8实验显示IP6-PAMAM-NH2具有良好的生物相容性。结论:本课题合成的IP6-PAMAM-NH2能够实现选择性胶原纤维外脱矿,达到了较强的粘接强度,并且不会导致脱矿牙本质层中MMPs的激活,有效避免传统酸蚀技术导致的界面结构完整性的损坏,展现了较高的抑菌能力和生物相容性,在改善复合树脂-牙本质粘接耐久性方面具有潜在的价值。
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