目的：　　 肺结核是严重的公共卫生问题。其传播范围广、早期无症状、无有效疫苗等特点决定了对此病最有效的预防干预措施是及时发现并治疗患者。长期以来，结核菌的检测技术没有显著的进步，传统的涂片抗酸染色镜检法和聚合酶链反应（PCR）仍是目前最常用检测方法，两种方法都存在缺陷，前者敏感性低、后者易出现假阴性和假阳性都是长期困扰防痨工作者问题，传统方法已不能满足当前结核病防治工作的需要。免疫磁珠分离技术（IMS）是一种有效的分离手段，在免疫检测、细胞及微生物分离、大分子物质纯化等领域得到越来越广泛的应用。本次研究旨在建立起免疫磁珠从痰液中分离结核杆菌的方法，并探讨其与传统的结核杆菌检测方法，包括涂片抗酸染色镜检和常规PCR检测，联合应用时对肺结核的诊断价值。　　 方法：　　 将人型结核分枝杆菌标准菌株H37Rv的纯培养物超声破碎制各菌体粗抗原，免疫新西兰大白兔获得多克隆抗血清，纯化血清IgG，经分析后直接包被于活化磁珠表面，并确定抗体包被磁珠的最适浓度、最佳包被时间。通过探索合适的痰液处理方法、免疫磁珠分离痰样的最佳pH值和最佳分离时间，建立起免疫磁珠从痰液中分离结核分枝杆菌方法。　　 利用建立的免疫磁珠分离技术分离临床痰样品中的结核杆菌后，再进行涂片染色镜检和PCR检测，通过比较免疫磁珠分离前后涂片和PCR法的检出率、灵敏度、特异度等指标，评价新建检测方法的应用价值。　　 结果：　　 本次研究制备的多克隆抗体效价为1:16000，SDS-PAGE电泳结果显示其纯化后具有良好的电泳纯度，抗血清中IgG浓度为1.05μg/μl。偶联时抗体与磁珠的最适比例为0.64μg/107个磁珠，包被时间以18h为佳，检测下限为103个菌/ml。通过试验，每毫升处理过的样品中加入磁珠的数目不少于2x107，磁珠与处理后的样品反应30min左右可达到较好的分离效果。　　 对痰内结核杆菌进行直接涂片、PCR检测及磁珠分离后再对分离物进行涂片、PCR检测，检出率分别为14.36％、18.78％、37.02％及50.83％。以培养法作为参考标准，直接涂片与磁珠分离后涂片法的灵敏度分别为36.92％和52.31％，后者较前者提高15.39％。以综合诊断指标做为参考标准，磁珠分离后涂片较直接涂片法灵敏度提高6.15％，磁珠分离后PCR较直接PCR检测的灵敏度提高20.77％。　　 结论：　　 本研究使用自制抗体包被的免疫磁珠，能有效分离出痰内的结核分枝杆菌；免疫磁珠分离技术与涂片法、PCR法联合使用，可提高后两者的检出率及灵敏度；通过两种方法的结合使用，检出了一部分使用常规方法难以检出的菌阳性患者，降低了漏诊率，对控制传染源的工作具有现实的意义，对新方法进一步完善后具有推广使用的价值。