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目的：探讨IL-24是否通过下调诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及上调硫氧还蛋白还原酶(TrxR1)，引起Bcl-2去亚硝基化(S-denitrosylation)修饰，进一步介导Bcl-2泛素化降解导致Bcl-2蛋白表达下调，最终引起肿瘤细胞凋亡。 方法：用条件增殖腺病毒ZD55-IL-24感染人宫颈癌(Hela)细胞、人肾癌(7860)细胞和黑色素瘤(A375)细胞，通过免疫印迹分别检测细胞中IL-24、iNOS、TrxR1、Bcl-2亚硝基化、Bcl-2泛素化、Bcl-2蛋白水平的表达及凋亡下游蛋白caspase信号通路的变化；检测蛋白酶体抑制剂(MG132)对Bcl-2表达的变化，IL-24小干扰(siRNA)对Bcl-2亚硝基化、Bcl-2泛素化和Bcl-2蛋白表达的影响，并检测iNOS小干扰(siRNA)及TrxR1抑制剂金诺芬(auranofin)对Bcl-2亚硝基化、Bcl-2泛素化、Bcl-2蛋白表达水平及caspase下游通路的影响；加入不同的一氧化氮(NO)调节剂通过改变Bcl-2亚硝基化水平，检测其对Bcl-2泛素化水平和凋亡下游通路蛋白caspase的活性影响及肿瘤细胞凋亡情况；用MTT及Annexin V-FITC/PI法检测ZD55-IL24对细胞凋亡的影响。 结果：1.条件增殖腺病毒ZD55-IL-24引起宫颈癌Hela细胞、肾癌7860细胞及黑色素瘤A375细胞中Bcl-2表达水平下降，其降解具有时间及浓度依赖性，并且进一步导致肿瘤细胞凋亡。 2.ZD55-IL-24引起Bcl-2亚硝基化水平下降(去亚硝基化)及Bcl-2泛素化水平增加；应用IL-24siRNA可逆转ZD55-IL-24的作用，使Bcl-2亚硝基化水平增加及Bcl-2泛素化水平下降。 3.ZD55-IL-24介导Bcl-2蛋白水平下降，激活caspase信号通路，引起肿瘤细胞特异性凋亡。 4.NO供体SNP可抑制Bcl-2去亚硝基化、Bcl-2泛素化水平增加及Bcl-2蛋白表达下降，而NO清除剂PTIO及SNP拮抗剂DTT逆转了以上结果；应用蛋白酶体抑制剂MG132逆转了ZD55-IL-24诱导的Bcl-2下调，说明Bcl-2亚硝基化修饰与泛素化降解蛋白酶体途径有关；为研究磷酸化是否影响NO介导的Bcl-2亚硝基化水平，结果表明Bcl-2亚硝基化修饰不会改变其磷酸化水平。 5.NO供体SNP可抑制caspase信号通路激活及肿瘤细胞凋亡，而NO清除剂PTIO及SNP拮抗剂DTT促进caspase信号通路激活及肿瘤细胞凋亡。 6.ZD55-IL24诱导iNOS蛋白水平下调；为研究iNOS是否涉及Bcl-2亚硝基化机制，给予iNOS siRNA感染细胞，结果表明iNOS siRNA使Bcl-2亚硝基化下降，Bcl-2泛素化水平增加，Bcl-2蛋白表达下调及caspase信号通路激活，说明iNOS在IL-24诱导Bcl-2去亚硝基化的机制中起至关重要的作用。 7.ZD55-IL-24介导TrxR1蛋白表达升高；TrxR1抑制剂金诺芬可逆转ZD55-IL-24介导的Bcl-2去亚硝基化及其泛素化降解，并抑制caspase信号通路激活，说明ZD55-IL-24可通过Trx/TrxR1酶系统调控Bcl-2的亚硝基化水平，并进一步促进Bcl-2的泛素蛋白酶体降解及肿瘤细胞凋亡。 结论：ZD55-IL-24通过iNOS及Trx/TrxR1酶系统双向调控Bcl-2去亚硝基化，从而促使其泛素化，最终引起Bcl-2降解及肿瘤细胞凋亡。