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[目的]耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是临床上重要的病原菌之一,可引起呼吸道、皮肤软组织、血液以及医疗器械相关性感染。MRSA常携带多种耐药基因和毒力基因,使菌株对常用抗菌药物不敏感,造成感染难以控制,治疗难度增加。此外,MRSA还常携带生物膜相关基因,在体内侵入性医疗器械或呼吸机上形成生物膜,增加了治疗难度。本研究以2017-2019年云南省某三甲医院检出的MRSA菌株为研究对象,探讨菌株耐药表型、常见耐药基因、毒力基因、生物膜相关基因携带情况;同时获得该院MRSA的spa分型、MLST分型、SCCmec分型特点和流行特征,以补充本地区MRSA分子流行病学资料;为MRSA的临床治疗及感染的预防和控制提供有价值的理论基础。[方法]1.收集云南省某三甲医院医学检验科微生物室2017年6月～2019年12月检出并保存的菌株,经手工常规鉴定、VITEK-2全自动微生物仪器鉴定、双重PCR扩增mecA和femB基因鉴定,共纳入65株MRSA;2.运用K-B法和MIC法对MRSA进行临床常用抗菌药物的敏感性检测;3.根据文献设计并合成引物,利用聚合酶链式反应(PCR)扩增MRSA的耐药基因 mecC、aac(6’)/aph(2")、Aph(3)-Ⅲ、ant(4’)-Ia、ermA、tetM、qnrA;毒力基因 PVL、fnbA、SEA、SEB、TSST-1、hla;生物膜相关基因 icaA、sarA、fnbB;4.采用金黄色葡萄球菌蛋白A基因多态性分型(spa分型)、多位点序列分型(MLST)和葡萄球菌基因盒分型(SCCmec分型)对MRSA进行分子分型;MLST结果采用MEGA7.0软件进行遗传信息分析;5.对ST59组与非ST59组菌株的耐药情况进行比较。采用SPSS 20.0进行统计分析,计数资料组间比较采用Fisher确切概率法(P<0.05表示差异有统计学意义)。[结果]1.标本类型和来源:65株MRSA主要分离自痰、分泌物和血液,分别占40.00%、21.54%和20.00%,其次是脓液、腹水、肺泡液和胸水,分别占13.85%、1.54%、1.54%和1.54%;科室来源分布以呼吸内科、神经内科为主,分别占13.85%和10.77%;2.耐药表型:65株MRSA对青霉素和苯唑西林耐药率为100.00%,对红霉素、克林霉素、四环素耐药率较高,均超过50.00%;对喹诺酮类、庆大霉素、利福平、复方新诺明均有不同程度耐药;多重耐药率高达92.31%。未发现对替考拉宁、奎努普汀/达福普汀、替加环素、万古霉素和利奈唑胺耐药的菌株;3.基因携带率:氨基糖苷类耐药基因aac(6’)/aph(2")、Aph(3)-Ⅲ、ant(4’)-Ia携带率较高,分别为43.08%、55.38%、15.38%;大环内酯类耐药基因ermA和四环素类耐药基因tetM携带率也较高,分别为60.00%、50.77%;喹诺酮类耐药基因qnrA携带率较低,为10.77%;未发现新型β内酰胺类耐药基因mecC;毒力基因 PVL、fnbA、SEA、SEB、TSST-1 和 hla 的携带率分别为 33.85%、89.23%、83.08%、76.92%、15.38%、92.31%;生物膜相关基因 icaA、sarA 和 fnbB 携带率高,分别为 98.46%、95.38%、86.15%;4.分子分型:65株MRSA中有17个spa型别,主要型别为t437、t030和t034;有16个ST型别,主要型别为ST59、ST239和ST338;有4个SCCmec型别,分别是 SCCmec Ⅲ、Ⅳa、Ⅴ、Ⅳb,分别占 46.15%、30.77%、16.92%和 6.15%。ST59菌株对喹诺酮类、庆大霉素和利福平的耐药率明显低于非ST59型菌株;5.ST59-MRSA-IVa-t437 和 ST239-MRSA-Ⅲ-t030 是本地区流行的主要ST-MRSA-SCCmec-spa 型别。[结论]1.MRSA感染部位以呼吸道、皮肤软组织感染为主,科室分布无明显聚集克隆;2.未发现对替考拉宁、奎努普汀/达福普汀、替加环素、万古霉素和利奈唑胺耐药的菌株,对其它类型抗菌药物耐药情况严重;3.ST59-MRSA-IVa-t437 和 ST239-MRSA-Ⅲ-t030 是最主要的流行型别;4.该院MRSA总体耐药、毒力、生物膜相关基因携带率高,多重耐药率高,毒力强,形成生物膜可能性和潜力较大,特别是对呼吸内科、血液内科等侵入性操作相对频繁的科室患者造成更严重的威胁,因此临床科室应当根据药敏结果合理选择抗菌药物,加强多重耐药菌的监测,根据分子流行病学结果采取适当措施控制MRSA的感染和传播。