不动杆菌(Acinetobacter sp．)JXCC2D菌株是由本实验室筛选所得，对菊酯类等化学农药具广谱、高效的降解作用。本研究以该菌株为原始材料，以pGEM-3Z为载体、E．coliJM110为受体菌，通过同尾内切酶MobI和BamHI酶切，成功构建了JXCC2D菌株的基因组质粒文库，文库的库容约为10~4、插入片段长度约为2～7kb。利用农药-Burk培养基和酯酶筛选培养基对所构建的基因组质粒文库进行筛选，选取在农药平板中生长、在酯酶筛选平板上形成透明圈的重组菌株。对筛选得到的重组菌株2-4-38进行了酯酶比活力测定和农药降解能力检测，实验结果表明：该重组菌株具酯酶活性，其比活力为0.535，并为胞外分泌型酶。该重组菌株作用高效氯氰菊酯、三氟氯氰菊酯、溴氰菊酯108 h后，降解率分别为66.0％、50.5％、95.7％；作用丙溴磷和哒螨灵72h后，降解率分别为32.5％和25.9％。对2-4-38重组菌株中插入的大小约为3.2 kb的外源片段进行亚克隆，并对亚克隆片段进行核苷酸序列测定、拼接，得到长为1854bp，具完整阅读框架，编码617个氨基酸的基因序列。该序列与假单胞菌MIS38(Pseudomonas sp．)的lipase具有94％的相似性。以原始菌株JXCC2D为模板，根据文库实验中获得的lipase基因序列设计引物，经PCR可扩增出完整的lipase基因序列，整个实验结果表明本研究已获得来源于不动杆菌(Acinetobacter sp．)JXCC2D、具有农药降解活性的脂肪酶基因，该基因序列已在GenBank注册(注册号为DQ906143)。现有文献表明脂肪酶基因功能中未见有降解农药的报道，本实验首次克隆到了具有广谱农药降解活性的脂肪酶基因。