雌激素胁迫下红树林微生物群落结构演替及雌激素降解菌株特性的研究

来源 :汕头大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:long31
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
近年来,由于工业污水以及生活污水大量排放,医疗废弃物、畜牧业养殖场中粪便的不正当处理,以及激素类药物在养殖、医疗中的大量使用,导致过剩的雌激素在环境中大量积累。环境中的雌激素在极低的水平下就能够对生物健康造成极大的影响,雌激素还可以通过食物链传递作用积累,进而影响整个生态系统平衡以及人类的健康安全。环境中丰富的微生物资源为去除环境中残留的雌激素做出了巨大贡献。因此研究雌激素影响下环境中细菌响应及功能极为重要,可以为解决环境雌激素污染提供重要科学依据。在本研究中,我们选取我国7个典型的红树林区域(广西北海、广西防城港、香港米埔、海南琼山、广东深圳、福建云霄、广东湛江)采集样品,在雌激素胁迫下对样品中的菌群进行传代培养,研究其菌群结构的演替。并尝试从中分离雌激素降解菌株,研究其降解功能与特性,得到的研究结果如下:
  (1)通过检测7个红树林站点原位样品中雌激素的含量,发现各站点含量最高的雌激素是雌二醇,1.6-15.3ng/g;其次是雌酮和乙炔雌二醇分别为:0.7-3.0ng/g,0.2-16.8ng/g;雌三醇含量最低为0.3-0.7ng/g。对各红树林站点样品中微生物群落进行基于16SrRNA基因的高通量测序,发现各站点菌群组成在结构上基本一致,都以变形杆菌门、拟杆菌门、绿弯菌门、酸杆菌门的菌群组成;丰度上略有不同,以变形杆菌门菌群丰度最高。
  (2)对各站点沉积物样品以雌酮为唯一碳源能源传代培养,并对第5、6次传代培养样品进行基于16SrRNA基因的高通量测序。结果表明,传代培养之后样品之间菌群结构基本相似,说明菌群已经达到稳定状态。各站点之间,北海、防城港、香港、湛江站点菌群结构和丰度基本相似,海南、深圳、云霄、站点区别较大,传代培养后的菌群结构相比于原位菌群结构有较大改变,北海、防城港、香港、海南、湛江站点的变形杆菌门菌群的丰度由60%左右上升至80%以上,云霄站点拟杆菌门菌群由20%上升至约70%,所有站点的绿弯菌门、酸杆菌门菌群大量减少,所占丰度不到3%。
  (3)从传代培养的样品中分离到3株可高效降解雌激素的菌株,分别为红球菌BH2-1、苍白杆菌M4、假单胞菌YX76。对其降解特性的研究表明:通过对实验发现菌株BH2-1能够降解雌酮、雌二醇、雌三醇、乙炔雌二醇、睾丸酮五种类固醇激素,菌株YX76能够降解雌酮、雌二醇、睾丸酮三种类固醇激素,菌株M4能够降解雌酮、雌二醇、乙炔雌二醇、睾丸酮四种类固醇激素;对三株菌基因组草图测定发现:菌株BH2-1、YX76、M4分别含有200、75、68个与外源性物质降解和代谢相关蛋白。其中主要有:类固醇异构酶,细胞色素P450类固醇激素单加氧酶,3δ-类固醇-1-脱氢酶,3-类固醇-9α-羟化加氧酶,3-氧化-5α-4-类固醇脱氢酶,3α-羟化类固醇脱氢酶,甾体脱氢酶类似酶,3α/20β-羟化类固醇脱氢酶以及一些类固醇转运蛋白。
其他文献
2009年是我第一次面对面见到了保罗,当时印象最深刻的是:他是一个有着超级感染力的邻家大男孩,但是很危险,特别是在场上的时候。他在比赛中轻易就过掉了四名球员组成的人墙式的防守,而在各种采访和活动中,保罗又比一般NBA球员表现得要敬业。他甚至对于任何一种示范都亲力亲为。保罗的侵略性和亲和力完美地融合是我对他最直观的印象。  在确定进入季后赛之后,黄蜂队全队对于时隔一年进入季后赛的现实并没有多少欣喜若
期刊
对虾养殖是世界水产养殖的重要组成部分,然而近年来病原性疾病不断威胁着对虾养殖业的健康发展。为了制定有效的防治策略,人们开始更加关注对虾先天免疫防御的分子机制。虽然已有诸多研究报道对虾体内存在多种能响应病原胁迫的应激蛋白,但与鱼类等高等水产养殖动物相比,还大为落后。因此,有必要采取新的策略,对对虾如何响应病原刺激进行深入研究和探索。为此,本研究在优化对虾血浆低丰度蛋白纯化技术的基础上,采用分子生物学、蛋白质组学和免疫学等策略,对白斑综合症病毒(whitespotsyndromevirus,WSSV)刺激后的
血蓝蛋白(Hemocyanin,HMC)是近年来在对虾中新发现的一种多功能免疫因子,其不仅具有酚氧化酶、抗病毒、抑菌、凝集等多种免疫学活性,而且还可参与多条信号通路的调控。MAPK(Mitogen-activatedproteinkinase)信号通路是在高、低等生物中普遍存在的一条重要信号通路,其可介导细胞生长、分化和凋亡等多种生物学过程。有趣的是,本课题组前期采用RNA干扰(RNAi)和组学分析等方法,初步发现凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)血蓝蛋白有可能参与MAPK通路的调控。为
对虾养殖业是我国沿海水产养殖业的支柱产业,而病害问题是制约该产业发展的主要瓶颈之一。目前,学者们认为加强对虾基础性研究,揭示对虾自身免疫防御机制是破解上述问题的关键环节之一。近年来研究发现,存在于对虾血淋巴中的血蓝蛋白(Hemocyanin,HMC)是一种多功能的免疫分子,其除了参与携氧外,还具有酚氧化酶、抗病毒、抑菌和凝集等多种免疫学功能。有趣的是,本课题组最新研究发现,凡纳滨对虾蛋白激酶CK2α(Litopenaeusvannameicaseinkinase2α,LvCK2α)可能介导血蓝蛋白的丝氨酸
有害藻华(Harmfulalgalblooms,HABs)是由浮游植物在水体中爆发引起的对人类社会与经济有害生态现象。随着近年来有害藻华频发,通过生物方法治理赤潮渐渐成为一种有效且洁净的方法。本论文围绕一株具有杀藻活性的藻际微生物Hahellasp.KA22,利用生物信息学的方法对其遗传结构及表达调控展开研究;并通过比较基因组学研究杀藻物质产生的机制,取得的主要研究成果如下:
  1)本论文首先对海洋杀藻菌Hahellasp.KA22的表观性状及杀藻活性展开研究。通过对杀藻物质的提取分离纯化,并利用
抗生素的发现和使用挽救了众多的生命,是人类在医学发展中的重大里程碑。然而,随着抗生素的使用,也出现了严重的病原菌耐药性问题。随着病原菌的耐药性越来越强,在治疗病原菌感染时所需要的抗生素剂量也越来越大,甚至原本低剂量就效果明显的抗生素也会失效,导致越来越多的人死于病原菌感染。病原菌耐药性的增强就需要更大量的抗生素,又会增强细菌耐药性,不利于人和动物的健康发展。
  水生生态系统被认为是抗生素抗性基因(antibioticresistancegenes,ARGs)的储存库,目前对一些内陆河流,尤其是受人
不经意间,又一个赛季结束了。看着墙上的赛程表,每个球迷心里或许都会有不同的感触。从对新赛季的憧憬到对全明星赛的期待再到对季后赛席位的猜测,终于82场常规赛尘埃落定,有些球队继续厮杀,有些球队各自散去。回首这个赛季,许多事件都掀起了无数的波澜,让人们无法忘怀。  不经意间,又一个赛季结束了。看着墙上的赛程表,每个球迷心里或许都会有不同的感触。从对新赛季的憧憬到对全明星赛的期待再到对季后赛席位的猜测,
期刊
南瓜多糖是从南瓜中提取分离出来的一类具有降血糖、抗氧化、抗肿瘤以及抑菌活性等功能的重要天然生物活性物质。目前对南瓜多糖的研究主要是多种组分整体多糖的活性研究,对各组分的结构、活性并未深入探讨。在降血糖方面,已有报道显示南瓜多糖对胰岛β细胞具有一定的保护作用,但对其具体的保护机制尚未明晰。因此本文通过建立体外细胞模型,对其可能的保护机制进行初步探讨。本文主要研究内容如下:
  (1)南瓜多糖的提取与分离纯化
  本文结合微波和超声辅助提取技术的优点,探讨超声微波辅助萃取仪提取南瓜多糖的最佳工艺条
去核的哺乳动物细胞(胞质体)已被广泛用于研究细胞核与细胞质在各种细胞过程中的不同作用,如细胞核对细胞迁移能力的影响、细胞核与线粒体等细胞器之间的关系、以及细胞质遗传等。在本次实验中,我们报道了一种改进的有效去除哺乳动物细胞核的方法,即将细胞接种在细胞外基质(ECM)包被的24孔皿,并在细胞松弛素B和秋水仙素存在的情况下于6000rpm/min和35℃离心60min。BMSC和BHK21细胞达到95%以上的去核效率。另外,我们也检测了细胞膜流动性对去核效率的影响,我们的实验结果表明,增加细胞膜的流动性能够显
白斑综合征病毒(Whitespotsyndromevirus,WSSV)是目前制约对虾养殖业健康可持续发展的主要病原之一。迄今为止,对虾养殖中仍缺乏防治该病毒的有效方法。究其原因,主要与人们对WSSV感染和致病的分子机制缺乏足够了解有关。近年来研究发现,WSSV极早期蛋白IE1可与对虾蛋白相互作用而参与对病毒感染的调节。然而,人们目前对IE1与对虾蛋白相互作用网络尚缺乏全面了解。为此,本研究以鉴定IE1相结合的对虾蛋白为切入点,探究IE1与对虾蛋白的相互作用网络,研究IE1在病毒感染中的功能和作用机制,以