目的:本论文的研究目的:一,应用Crispr/cas9技术建立KRAS基因低表达的胰腺癌细胞株,探讨KRAS基因与胰腺癌生物行为之间的关系。二,利用生物信息学分析找出KRAS基因相关性最高的基因F11R。三,利用慢病毒载体介导的RNA干扰技术敲减胰腺癌细胞株的F11R基因,探寻F11R和胰腺癌细胞生物行为学之间的关系,探索此基因是否可作为胰腺癌的潜在的诊断和治疗靶点。研究方法:(1)利用Crispr/cas9技术建立KRAS基因敲减的胰腺癌细胞株,筛选出KRAS基因低表达的细胞系;(2)进行相关细胞行为学实验,包括:细胞增殖实验、细胞划痕实验、细胞侵袭实验、细胞克隆实验、Trans well、裸鼠荷瘤实验等。此外利用流式细胞学检测细胞早期凋亡比例及其周期的改变,最后统计分析数据,探寻该基因对胰腺癌增殖、迁移、凋亡及体内成瘤能力的影响;(3)生物信息学分析相关基因数据库,查找与KRAS基因密切相关的基因。(4)利用慢病毒包装的RNA敲减质粒建立F11R敲除株,筛选出F11R基因低表达的细胞株;(5)进行相关细胞行为学实验,包括:细胞增殖实验、细胞划痕实验、细胞侵袭实验、细胞克隆实验、Trans well、裸鼠荷瘤实验等。此外利用流式细胞学检测分析细胞早期凋亡比例及其周期的改变,最后统计分析数据,探寻该基因对胰腺癌增殖、迁移及凋亡的影响。结论:(1)利用Crispr/cas9建立KRAS基因敲减胰腺癌细胞株,筛选出KRAS基因低表达的细胞株B14。(2)一系列生物行为学实验验证了,敲减KRAS基因倾向于负调胰腺癌细胞的恶性程度。(3)通过生物信息学分析找到KRAS基因相关度极高的F11R基因。(4)F11R基因作为KRAS基因相关度极高的基因,参与胰腺癌细胞的增殖、凋亡、侵袭及转移,影响着胰腺癌的发生发展。(5)敲减胰腺癌细胞的F11R基因后,胰腺癌细胞恶性程度有所降低,F11R基因或可为胰腺癌的潜在治疗靶点。