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本研究的目的是初步建立桂花(Osmanthus fragrans Lour.)组织培养体系。实验以冬季休眠芽、正在萌发的芽、当年生幼枝的茎尖和茎段、不同发育时期的胚为外植体,着重研究其最佳的取材时期、最佳的培养条件,以及培养过程中防止污染和褐化的技术措施,初步建立了桂花组织培养体系。 结果表明: (1) 营养器官的组织培养中,正在萌发芽和当年生幼嫩枝条的顶芽是最理想的外植体,且它们的顶芽要尚未停止生长。 (2) 初代培养时,培养基中加入 0.5 g/L 的 PVP,可以有效地防止组织培养过程中外植体褐化。 (3) 初代培养:正在萌发芽较理想的初代培养基为 B5(基本培养基)+6-BA5.0mg/L+NAA0~0.05mg/L+30 g/L 蔗糖,萌发率可高达 84.4%;幼枝顶芽较为理想的培养基为 B5+6-BA3.0mg/L+NAA0~0.05mg/L+30 g/L 蔗糖,萌发率可达 80.0%。不同的基因型之间存在一定的差异。 (4) 芽的增值:在我们的实验中发现,即使给予高浓度的 6-BA,培养材料没有产生丛生芽,属于无菌短枝型。最适合的增值培养基为 B5+6-BA2.0mg/L+NAA0~0.05mg/L+30 g/L 蔗糖。 (5) 适合桂花茎尖诱导苗离体生根的培养基为 B5+NAA2mg/L+30 g/L 蔗糖。 (6) 桂花果实成熟后,种子需要长时间的休眠,组织培养可以促进桂花种子的提前萌发。合适的取材时间为胚乳完全硬化到果实完全成熟时。 (7) 适合胚萌发的培养基为 B5+6-BA2.0mg/L +50 g/L 蔗糖。光照条件下好于黑暗条件。 (8) 适合试管苗伸长的培养基为 B5+6-BA1.0~2.0 mg/L +30g/L 蔗糖。 (9) 适合胚诱导的试管苗离体生根的培养基为 B5+IBA2.0 mg/L +30g/L 蔗糖。