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目的:牙髓细胞是牙髓组织的主体细胞,是牙体组织损伤再生修复能力的重要成份。提高牙髓细胞增殖活性有利于牙髓组织修复过程的顺利进行。因此,体外培养牙髓细胞,揭示牙髓细胞的增殖、分化特性对牙髓组织的损伤修复具有重要意义。中药作为天然药物因其具有毒副作用较小的优点而越来越受到人们的欢迎,从天然药物中寻找新的有效药物正成为全世界医药学的研究热点。本实验采用组织块法原代培养人牙髓细胞,观察人牙髓细胞的生物学特性,为牙髓组织工程的发展奠定基础。提取中药黄连、黄芩、骨碎补复合制剂有效成分,作用于体外培养的人牙髓细胞,四唑盐比色法(MTT)检测、超微结构下观察以阐述中药双黄补对人牙髓细胞增殖特性的影响。最终为牙髓组织的损伤修复寻找最佳治疗用药。 方法: 1 牙髓细胞原代培养及细胞生长特性 1.1 牙髓细胞原代培养和传代 选择20岁以下正畸待拔除牙或待拔除阻生智齿。口腔常规消毒,拔牙后立即移入超净工作台。牙钳钳开,拔出牙髓,去除根尖部2 mm牙髓组织,将牙髓组织剪碎平铺于25ml培养瓶底,加含20%胎牛血清(FBS)的DMEM,倒置于培养箱,3 h~4 h后翻瓶。观察细胞游出和生长情况。待